Изготовление сложных потолков из гкл: Потолок из гипсокартона, подвесной потолок из гипсокартона | Монтаж гипсокартона на потолок своими руками пошагово (ГКЛ)

Содержание

Потолок из гипсокартона, подвесной потолок из гипсокартона | Монтаж гипсокартона на потолок своими руками пошагово (ГКЛ)

Укладка гипсокартона на потолок – процесс тяжелый и трудоемкий. Одному справиться с задачей такого рода бывает непросто. Именно поэтому без вспомогательного поддерживающего приспособления не обойтись. Обшивка потолка гипсокартоном возможна лишь в том случае, если придерживаться инструкции о том, как монтировать гипсокартон на потолок:

  1. применять в работе специальные саморезы для гипсокартона, окрашенные в черный цвет;
  2. осуществлять монтаж потолка из гкл при помощи крепежей нужно с шагом 15-20 см с отступом от края на 10-15 мм;
  3. фиксацию производят как по периметру плиты, так и самого профиля, что подходит под ее центром;
  4. саморезы на соседние листы закрепляют с незначительным отступом сравнительно друг с другом;
  5. в ходе установки, крепежи заглубляют в средину ГКЛ;
  6. по всему периметру ГКЛ стоит оставлять незначительный, порядка 3-5 миллиметров шов.

Во время производства гипсокартона, листы приобретают немного округленные края (кромки). Подобная форма краев весьма удобна для шпаклевки стыков. Сначала стыки покрывают грунтовочным раствором на основе акрила, далее при помощи шпателя наносят раствор для выравнивания.

Тем, кто до этого никогда не готовил шпаклевку, рекомендуется детально ознакомиться с инструкцией на упаковке. Чтобы достичь максимальной прочности, поверхность понадобится проклеить серпянкой для усиления армирующих свойств. Чем меньше толщина листа, тем проще покрыть раствором малярную ленту, получая идеально ровный гипсокартонный потолок своими руками.

Дальнейшие ремонтные манипуляции представляют собой выполнение чистовой декоративной отделки (отделка гипсокартона под покраску, окраска, оклейка обоями или побелка).

Поверхность под выполнение шва должна быть очищена от пыли и частиц гипса. В зависимости от вида используемой шпаклевочной массы или шпаклевочного гипса различают обработку швов с армирующей лентой или без армирующей ленты.

В обоих случаях на первом этапе распределяем шпаклевочную массу в поперечном к линии стыка плит направлении, вдавливая ее по возможности глубже и тщательно заполняя всю щель. Затем одним непрерывным движением, лучше всего одним протягиванием, распределяем и разглаживаем шпаклевочную массу вдоль всего шва.

Как подшить потолок гипсокартоном: сборка опорной конструкции

Осветительные приборы гипсокартонных сооружений фиксируют на дополнительной нише (полке). В процессе монтажа, в первую очередь, крепят профили на потолок и стену. Этап разработки чертежей конструкции предполагает закладывание вертикальных стоек длиной 10, максимум 15 см.

Крепление данных элементов несложное, в потолочном профиле, конец которого направлен вниз, ножницами для резки металла отрезают широкую плоскость (примерно 30-40 мм).

Отрезанный участок можно смело считать аналогом подвеса, один край которого вставляют в потолочную направляющую, а к другому концу крепят профиль, позволяющий сформировать горизонтальный карниз.

Полученный подвес располагает двумя точками фиксации – стена с вмонтированной направляющей и отвесные стойки, провисающие с потолка.

Финальным пунктом данного этапа является крепление П-образного профиля на торчащие горизонтальные края основания, длиной 5-10 см. Таким образом, между отвесными стойками получается сформировать небольшую нишу. Габариты данного приспособления позволяют с легкостью скрыть трансформатор, элементы управления светодиодами и т.п.

Устройство потолка из гипсокартона можно обшивать листами лишь после монтажа проводки и соответствующих осветительных приборов.

Итоговая отделка и подсоединение элементов освещения

В гипсокартонных плитах PLATÓ следует выполнить отверстия, через которые будет прокладываться проводка или устанавливаться осветительная арматура.

В случае потолков, к которым выдвигаются требования относительно противопожарной защиты, отверстия, через которые были проложены отдельные электрические провода, должны быть полностью заполнены шпаклевочной массой. Пучки (связки) проводов,проходящие сквозь плиты, должны быть защищены способом, отвечающим противопожарным требованиям.

Если потолок с вмонтированной осветительной арматурой должен отвечать противопожарным требованиям, следует использовать корпуса/кожухи ламп, выполненные в соответствии с официальной классификацией или Техническими условиями.

Конструкцию подвесного потолка можно приспособить к дополнительным нагрузкам (проводка, осветительная арматура) путем уменьшения расстояний (более густой установки) между подвесками и несущими профилями.

В случае потолков, которым присвоен класс огневой нагрузки снизу, необходимо обратить внимание на то, чтобы максимально допустимая огневая нагрузка в пустом пространстве потолка, например, от электрических проводов, не была превышена. Максимальное значение нагрузки составляет 7 кВт час/м2. Если огневая нагрузка будет превышена, следует воспользоваться отдельными кабельными каналами или специальными потолками, которым присвоен класс огневой нагрузки сверху.

Потолок из гипсокартона своими руками выполнить пошагово несложно, на финальном этапе остается лишь обшить полученное основание листами, с торца на горизонтальную плоскость прикручивают малогабаритную планку, маскируя с ее помощью подсветку. Вся поверхность и места фиксации крепежей выравнивают готовым раствором шпаклевки.

Заключительный момент, позволяющий считать все ремонтные работы завершенными, — это крепление светодиодных лент. Подобные элементы позволяют создавать сказочные элементы, играя со светом. Светодиодная лента монтируется на горизонтальную поверхность. Для надежной фиксации потребуется воспользоваться двухсторонним скотчем. Ленту монтируют так, чтобы при включении поток света направлялся вверх, рассеивался и освещал весь потолочный периметр.

Подвесные потолки различных модификаций позволяют скрыть все коммуникации, а в деревянном доме за ними размещают теплоизоляционный контур. Важно помнить, что подвесные гипсокартонные потолки подходят не для любых помещений, ведь они могут снизить высоту комнаты до 15-20 сантиметров.

Соорудить потолок из гипсокартона не представляет особых трудностей, достаточно внимательно ознакомиться с тонкостями и представленными пошаговыми инструкциями. Если приложить максимум усилий и стараний, то готовая конструкция будет долго радовать взор хозяевам дома и приглашенным гостям, не теряя своей первоначальной формы и эстетичной привлекательности.

Изготовление потолков из гипсокартона — видео технологии монтажа

Изготовление потолков из гипсокартона(ГКЛ) сегодня очень популярно. Этот универсальный материал используется повсюду: в жилых помещениях, торговых центрах, офисах, складах. С его помощью можно создавать перегородки, декоративные конструкции или просто выравнивать поверхности.

ГКЛ — «сэндвич», который состоит из двух слоев плотного картона и гипсовой сердцевины, в состав которой вводятся различные пластификаторы и модификаторы, которые значительно улучшают показатели качества. Для обработки картонных слоев также используются специальные пропитки, которые увеличивают устойчивость материала перед внешним воздействием.

Виды ГКЛ

На данный момент существует четыре основных вида гипсокартона, выпускаемого как отечественными, так и зарубежными производителями:

  1. ГКЛ — это материал, используемый в процессе изготовления поверхностей в жилых или офисных помещениях. Обязательным условием в таких помещениях должна быть относительно стабильная температура и влажность воздуха. Не содержит специальные добавки, а поверхность не пропитана защитными средствами, поэтому при воздействии влажности может утратить свои качества, а также частично деформироваться.
  2. ГКЛО — огнестойкая разновидность. Компоненты, входящие в состав наполнителя увеличивают способность материала противостоять воздействию огню. Их используют для отделки помещений на чердаке, отделки электрических щитов. Очень часто эта разновидность применяется в качестве отделочного материала на производстве. Листы также имеют обычный серый цвет, но при этом маркировка наносится красным цветом.
  3. ГКЛВ — влагостойкий материал, который не подвержен воздействию повышенной влажности. Такие показатели достигаются за счет ввода в состав антибактериальных компонентов и силиконовых гранул. Также для защиты сердцевины используется импрегнированный картон. Для того, чтобы значительно повысить показатели качества после установки листов их лицевую поверхность рекомендуется обработать антисептическими грунтовками. Используется такой гипсокартон в помещениях с повышенным уровнем влажности — кухни, ванные комнаты. Такие листы маркируются синим цветом.
  4. ГКЛВО — универсальная разновидность, которая совместила в себе все показатели ГКЛВ и ГКЛО. Этот вид отделочных материалов используется в промышленных помещениях с требованиями соблюдения правил пожарной безопасности. Листы обладают зеленым цветом и красной маркировкой.

Отделка поверхности

С помощью ГКЛ сегодня можно не только скрыть недостатки старой поверхности, но и сделать помещение более интересным, изготовление сложной поверхности из ГКЛ — очень интересный процесс, с которым справится даже непрофессионал. Также гипсокартонные конструкции увеличивают такие показатели помещения как звукоизоляция и теплоизоляция. Для того, чтобы сделать его более интересным можно использовать разнообразные формы, цвета и подсветки.

Сегодня существует достаточно много методов монтажа, и в большей степени зависит от фантазии проектировщика. Но основой для его создания является три основных разновидности, от которых потом можно отталкиваться при создании необходимой композиции:

  • одноуровневый;
  • простая поверхность на два три уровня;
  • сложная конструкция.

Одноуровневый, несложный потолок из гипсокартона считается классическим вариантом отделки. Его зачастую используют в том случае, если необходимо просто выровнять поверхность. Изготовление поверхностей можно произвести своими руками без посторонней помощи. Крепится ГКЛ на металлопрофильный каркас с помощью саморезов. Готовая поверхность шпаклюется, зашкуривается и красится.

Поверхности, которые имеют два или три уровня считаются более сложной конструкцией.

На заметку: Для того, чтобы провести работы по монтажу самостоятельно стоит ознакомиться с основными рекомендациями.

В простом варианте такая конструкция представляет собой несколько уровней, при этом каждый уровень имеет меньшую площадь, чем у предыдущего. Каркас для такой поверхности делается, как и в первом варианте только с одним отличием. Основанием для второго уровня будет не бетонное основание, а предыдущий каркас.

Технология изготовления сложного гипсокартонного покрытия в создании каркаса практически не отличается от второго варианта. Единственное это более сложные узоры, которые выполняются с помощью уровней. Самым оригинальным вариантом сложной конструкции являются парящие поверхности. Они особенным образом крепятся к бетонному основанию и в большинстве случаев на них дополнительно устанавливается подсветка. В результате такие элементы визуально кажутся незакрепленными, а словно отдельные элементы.

Советы

Несколько советов по монтажу:

  1. С помощью подсветки многоуровневой конструкции можно сделать дополнительное декоративное решение. Так же сделав подсветку в разных участках поверхностей и подключив выключатели, можно регулировать освещение той или иной зоны.
  2. Для того, чтобы придать изогнутую форму профилю и ГКЛ стоит подготовить воду, игольчатый валик, а для надрезания профиля — ножницы для резки металла.
  3. В помещениях с невысокими поверхностями не стоит делать слишком громоздкие конструкции и опускать их очень низко, это может визуально сдавить помещении и вызывать чувство дискомфорта.

Также читайте: Ремонт подвесных потолков.

Видео по теме

 

Цены на монтаж гипсокартона, стоимость потолков из гипсокартона, перегородок, выравнивания стен.

 

     Монтаж гипсокартона это один из этапов отделочных работ в квартире или офисе, который включает в себя выравнивание стен гипсокартоном, возведение перегородок из гипсокартона, устройство потолков из гипсокартона, как одноуровневых, так и многоуровневых с целью создания дополнительной тепло- и звукоизоляции помещений и сокрытия инженерных коммуникаций. Так же гипсокартон используется для создание арок, декоративных ниш, различных куполов, светильников и оригинальных декоративных элементов, которые сложно или невозможно выполнить иным способом.


     Благодаря своим качествам гипсокартон один из самых распространенных материалов для внутренней отделки квартир, коттеджей или офисов. Этот материал является природным и экологически чистым, позволяет создать комфортный для работы и жизни микроклимат в помещении. На данный момент производители предлагают различные виды гипсокартона, как по назначению (влагостойкий, огнестойкий, акустический, ударопрочный), так и по размерам.

Вид работы Ед. изм. Цена за ед.
  Потолки из гипсокартона (подробнее)
1 Ровные потолки в один слой м2 от 800
2 Ровные потолки в два слоя м2 от 1200
3 Многоуровневые потолки м2 от 1600
  Перегородки из гипсокартона (подробнее)
4 Перегородка с обшивкой в 1 слой гипсокартона м2 800
5 Перегородка с обшивкой в 2 слоя с каждой стороны м2 1000
  Обшивка стен (подробнее)
6 Обшивка стен в 1 слой гипсокартона м2 600
7 Обшивка стен в 2 слоя гипсокартона м2 700
  Короба
8 Стандартный короб Г-образный п/м 800
9 Короб со встроенной скрытой подсветкой п/м от 1200
10 Арки из гипсокартона шт от 3500
  Другие работы
11 Шумоизоляция минватой м2 150
12 Шумоизоляция (подробнее) м2 от 900
13 Малярные работы м2 от 600
14 Укладка ламината, паркетной доски м2 от 500
15 Плиточные работы м2 от 1200
16 Монтаж плинтусов (пластик) м2 от 150
17 Электромонтажные работы м2 от 1200
18 Комплексный ремонт м2 от 10000

 

  • Если высота потолков более 3 метров, то цена увеличивается на 150 руб/м2 на каждый метр, превышающий 3 метра высоты.
  • При опускании потолка ниже 12 см. от перекрытия (высота стандартного подвеса) цена увеличивается на 100 руб/м2
  • Расчет произведен на монтаж каркаса с расстоянием между профилями – 400 мм.
  • Минимальный заказ от 50 кв.м (сложные конструкции), от 100 кв.м. (прямые).

Какие бывают виды гипсокартона.


     Изначально видов гипсокартона по толщине было всего три. Это 12.5 (для установки на стены и потолок для прямых конструкций), 9.5 мм (для зготовления радиусов методом сухого сгибания до 600 мм) и 6 мм (так называемый арочный гипсокартон, для изготовления различного вида лекальных конструкций и радиусов методом сухого сгиба до 300мм). Несмотря на наметившуюся в России тенденцию разделения на потолочный и стеновой гипсокартон не существует в природе. Как и описано выше тонкие виды предназначены для того что бы было легче гнуть без применения насыщения гипсового сердечника водой, что может привести к отслаиванию верхнего слоя бумаги. Т.е. по сути мы в сухом остатке имеем три основных вида гипсокартона: основной (12.5 мм), для изготовления больших радиусов (9.5 мм) и для изготовления малых радиусов (арочный гипсокартон толщиной 6мм). Вся информация по данному вопросу доступна в альбомах технических решений компаний Кнауф или Гипрок. В настоящее время так же производители предлагают к использованию гипсокартон толщиной 15, и 25 мм толщиной. Эти виды гипсокартона предназначены для усиления конструкций и имеют узкое применение.

     Помимо толщины, гипсокартон бывает:
Обычный (ГКЛ). Белого или светло-серого цвета. Используется для помещений с нормальной влажностью. Таких как спальни, залы, детские, гостиные и прочее.
Влагостойкий (ГКЛВ). Обычно бывает зеленого цвета. Предназначен для помещений с небольшой влажностью. Таких как холлы, прихожие, ванны и санузлы без прямого контакта с влагой (например в санузлах стены обычно отделываются плиткой, а потолки красятся специальной паронепроницаемой краской)
Огнестойкий (ГКЛО, ГКЛВО). Обычно розового или красного цвета. Используется в основном для коммерческих помещений с повышенными требованиями пожарной безопасности. Для облицовки стен, несущих колонн и проч.
Акустический (ГКЛА). Обычно сиреневого или фиолетового цвета. Используется в конструкциях с повышенной звукоизоляцией и имеет армированный сердечник. Обладает повышенной прочностью по сравнению с другими видами гипсокартона.
Ударопрочный. На данный момент к таким видам можно отнести только гипсовую строительную плиту компании Gyprock Habito. Этот лист имеет гораздо более усиленный сердечник по сравнению с другими видами гипсокартона. Использовать такой лист имеет смысл только в тех местах которые требуют особой защиты. Такие как прихожая, различного виды спортзалы, лестничные пролеты.

     Несмотря на свою кажущуюся хрупкость, отделывать гипсокартон можно не только под обои или окраску, но и класть на него плитку, мрамор или использовать другие виды декоративных покрытий.  

Монтаж потолков из гипсокартона.

       

     Гипсокартона монтируется на потолок с помощью металлического или деревянного каркаса. Но так как мы живем не в Калифорнии, где наблюдается стабильная влажность и климат, то мы монтируем только на металлический каркас. Дерево при попадании влаги начинает «вести» и на потолках неизбежно появляются трещины.
     В основном существует два типа металлического каркаса для монтажа потолков – это жесткий и плавающего типа. Жесткий применяется в помещениях с жесткими, неподвижными или малоподвижными, например бетонными перекрытиями, а плавающий с деревянными перекрытиями (например мансарды) или для создания дополнительной звукоизоляции. При монтаже выбор правильного типа каркаса является самым главным решением, и если вы не знакомы с тонкостями монтажа потолков из гипсокартона, то хотя бы проконсультируйтесь со специалистами в данной сфере и не поленитесь прочитать соответствующую литературу.
     Так же гипсокартон, за счет относительной простоты монтажа позволяет создавать различные многоуровневые потолки, потолки с подсветкой, различные дизайнерские конструкции.


Монтаж перегородок из гипсокартона.

        

Монтаж перегородок из гипсокартона выполняется на различные типы каркаса. Монтаж на деревянный каркас мы отметаем, как неподходящий к нашему климату, остается монтаж на металлический каркас. Большинство перегородок собирается на одинарный металлический каркас с обшивкой в 2 слоя гипсокартона с каждой стороны и внутрь укладывается звукопоглощающий материал (например акустическая вата). Двойной разнесенный каркас имеет специфическое назначение и используется для улучшения звукоизоляционных свойств перегородки.

     Так же как и для всех конструкций из гипсокартона каркас бывает жесткий и плавающий, что позволяет применять такие перегородки во всех типов домов. В данной статье мы не будем рассматривать такие банальные вещи как прокладка демпферной ленты по периметру, почему и как обшивка каркаса для перегородок должна использоваться только в 2 слоя гипсокартона и другое. Хотим обратить внимание что многие специалисты введены в заблуждение и используют для монтажа перегородок профиль сечением 50мм, хотя он используется исключительно для обшивки стен. Хорошая и прочная перегородка из гипсокартона начинается с качественного профиля толщиной не менее 0,6мм и сечением от 75 мм. Только в этом случае вы получите заявление производителем звукоизоляционные и прочностные характеристики. Далее по своим характеристикам правильно собранная перегородка имеет более высокие показатели по шумоизоляции чем та же перегородка из пеноблока или пазогребневого блока, за счет различной плотности материалов входящих в состав и готовую поверхность для проведения малярных работ.  Перегородки из кирпича, пеноблока и других материалов необходимо штукатурить.


Выравнивание стен гипсокартоном.


     В основном выравнивание стен гипсокартоном применяется для того что бы скрыть большие неровности стен, спрятать инженерные коммуникации, а так же для создания дополнительной шумоизоляции и теплоизоляции существующих стен. Некоторые виды стен, таких как деревянные, невозможно подготовить к окраске или уложить на них керамическую плитку, оклеить обоями. Выравнивание происходит либо по металлическому каркасу, либо на специальный клей. К сожалению выравнивание стен гипсокартоном бескаркасным способом мы не практикуем.

     Конечно, как строительный материал гипсокартон не лишен недостатков. Но по нашей практике большинство негативных отзывов об отделке данного типа связано в 99% случаях с непрофессионализмом исполнителей и с низкой культурой монтажа гипсокартона, а не с самим материалом. Мы же в свою очередь тратим большое количество времени на изучение новинок, а так же постоянно обмениваемся опытом, в том числе и с коллегами за рубежом.
     Итак. Монтаж гипсокартона это очень легко если знать как! И к нашему счастью мы знаем как! В настоящее время наша деятельность не ограничивается только гипсокартоном. Мы так же предлагаем услуги по профессиональной шумоизоляции квартир, домов, высококачественной штукатурке стен, производим электромонтажные работы, малярные работы механизированным способом, выполняем сложные элементы фрезеровкой гипсокартона и другие. И все это по доступным ценам. Звоните! Мы с удовольствием проконсультируем по всем вопросам!

   Звоните или оставляйте заявку прямо на сайте.

фото и видео монтажа в зале


Любой человек хочет сделать интерьер своей квартиры необычным и интересным, применяя различные материалы и декор. Многоуровневые потолки из гипсокартона все чаще применяются в оформлении помещений. Декоративная, криволинейная конструкция на потолке смотрится очень органично.

Пример дизайна и оформления многоуровневого потолка из гипсокартонаВернуться к оглавлению

Полное содержание материала

Особенности многоуровневых конструкций

Как часто приходится разграничивать большое помещение на несколько зон, и помочь в этом поможет правильная отделка потолочной поверхности. При обустройстве многоуровневой конструкции помещение можно зонировать при помощи цвета, зеркал, или специального освещения.

Часто применяют потолок из гипсокартона с подсветкой в кухнях-студиях, где потолок помогает разделить гостиную и рабочую зону. В большой комнате, простой белый потолок, смотрится скучно, а если обустроить вертикальную криволинейную конструкцию – комната приобретет привлекательный и интересный вид. Самым простым вариантом конструкции, которую можно обустроить на потолке своими руками – двухуровневый потолок из гипсокартона.

Вариант конструкции и дизайна многоуровневого потолка в гостиной

Это криволинейная или прямая конструкция, надстроенная на первый уровень гипсокартонного потолка. Можно обустроить простой невысокий уступ, а можно соорудить нишу из ГКЛ, в которой будет обустроена рассеянная подсветка, по типу парящего потолка. Второй уровень потолка обычно обустраивают вдоль одной стены. Многоуровневый потолок из гипсокартона своими руками соорудить несложно.

Проект гипсокартонного потолка с размерами и уровнями

Можно соорудить трехуровневый потолок, его конструкция отличается только числом ступеней на потолке. Но стоит понимать, что если уступов предусмотрено несколько, то следует усилить несущую конструкцию, максимальная нагрузка должна составлять 14 кг на один квадрат площади. Сделать многоуровневый потолок из гипсокартона проще прямолинейным в несколько уровней, чем фигурный.

Самым сложным считается нанесение разметки – от этого процесса зависит успех в монтаже красивого, фигурного потолка из ГКЛ.

Вернуться к оглавлению

Предварительные работы: чертежи и разметка

Прежде чем начинать работу, нужно рассмотреть варианты многоуровневых потолков из гипсокартона и выбрать подходящий. Вы оценили свой потолок, и решили сделать красивую криволинейную конструкцию, по определенному дизайну. Начинать нужно с чертежа и разметки, и только потом браться за реализацию своих идей. Устройство многоуровневых потолков из гипсокартона начинается с чертежа.

Объемную фигуру на потолке невозможно создать, не применяя чертеж. Можно сделать схематический рисунок на бумаге, а можно скачать на компьютер специальную программу. Грамотную разметку можно сделать, замерив, горизонталь потолка, на которой разметить все подвесы для профиля и каскады.

Чертеж и разметка всех уровней потолка из гипсократона

Как правильно составить чертеж:

Как только на бумаге будет все понятно и правильно размечено, можно начинать разметку поверхности потолка.

Вернуться к оглавлению

Подготовка к монтажу

Как только разметка потолка успешно выполнена, можно отправляться за покупками. Материал не стоит покупать впритык, чтобы работа не остановилась, из-за того, что не хватило одного профиля, или нескольких подвесов, поэтому стоит купить на 10% больше требуемого количества комплектующих.
Перечень материалов, которые необходимы перед началом работы:

Вернуться к оглавлению

Устройство каркаса

Перед тем, как начать монтировать каркас на потолок, приготовим инструмент, который будет необходим:

Смонтированный каркас многоуровневого потолка

Первым делом нужно обустроить основной уровень поверхности, для этого прикрутить к стенам стартовый профиль – это будет основание под несущую конструкцию. Крепятся профиля на дюбель-гвозди шагом 25 см. Следующим шагом будет крепление промежуточных стоечных профилей к направляющим при помощи саморезов по металлу. На этом первый этап установки многоуровневого потолка можно считать законченным. Можно начать собирать второй уровень.

Собранный каркас и обшитый гипсокартоном в виде круга

Закрепляем на стенах несущую конструкцию, по разметке. При помощи подвесов, которые прикручивают к основной обрешетке саморезами. К этим подвесам крепится профиль, который будет формировать дополнительный ярус потолка.

На фото видно, что был собран каркас потолка на первом уровне, это 70 мм. — 10 мм. = 60 мм. от нуля, также на этом же уровне был собран круг и зашит. Я не буду вдаваться в подробности, как собирать основной потолок, об этом уже было рассказано в предыдущих записях, я расскажу о порядке выполнения до существующего потолка на фото. Первым делом нам необходимо отметить на потолке центры окружностей и прочертить по указанным радиусам эти окружности.

Здесь важно отметить, что при прочерчивании внешнего круга мы уменьшаем радиус на 10 мм, а при прочерчивании внутреннего, соответственно увеличиваем на 10 мм, еще раз объясню с чем это связано — по прочерченным линиям на потолке мы будем прибивать направляющий профиль, следовательно гипсокартон (6 мм), который будет крутится на этот профиль, увеличит радиус окружности на 6 мм.

Нанесение шпаклевки потолка с несколькими уровнями

Плюс шпаклевка заберет 2 — 4 мм. В итоге мы попадем в размер на чертеже.

Как чертятся окружности на потолке

  • Отмечаем карандашем центр окружности и пробиваем перфоратором отверстие;
  • Вставляем пластмаску от дюбеля в отверстие;
  • Далее берем направляющий профиль, находим на ней заводское отверстие;
  • От этого отверстия отмеряем нужный радиус по длине и ставим в том месте метку;
  • Затем саморезом просверливаем на метке второе отверстие;
  • И уже через это отверстие прикручиваем к потолку с помощью дюбеля направляющую;
  • В заводское отверстие вставляем карандаш и рисуем окружность;
  • После того, как нарисовали круги нарезаем направляющие сегментами и прибиваем их к потолку по радиусам.

    Так выглядит направляющий профиль, разрезанный болгаркой

Разрезать направляющий профиль на сегменты, можно с помощью строительных ножницРазрезанный металлический профиль, который можно фиксировать, для создания фигур на потолке

Учтите, что мы прибили направляющие не по всем окружностям, а только по тем, что находятся на первом уровне от нуля. Затем идет сборка всего каркаса на уровне 60 мм. от нуля, есть правда одно но, не надо ставить скобы где не будет потолка по чертежу, то есть скобы ставятся возле направляющей, прибитой к потолку по окружности.

После того, как каркас собран, обрезаем профиля по краю направляющей минус 5 мм., чтоб потом можно было надеть на край профиля другую направляющую, также порезанную на сегменты, но не так, как мы резали на потолок, в этих направляющих необходимо обрезать только боковые полки, основная же остается целой, затем одеваем направляющую на профиля не прикручивая, вырезаем полосы по 60 мм. из гипсокартона 6.5 мм. желательно по всей длине (250 см.), крепим эти полосы выгибая к верхней направляющей, затем крепим к низу гипсокартонной полосы ту направляющую, которую мы заводили не прикручивая.
В итоге у нас должно было получится то, что мы видели на верхней фотографии в начале статьи. Исключение составляет то, что круг в середине зашит. Но я думаю, для тех, кто читал блог, не составит труда зашить круг.

Если предусмотрена криволинейная конструкция, то профиль надрезают по боковым стенкам, чтобы проще было создать кривую линию. Конструкция должна быть жесткой – шаг профилей 40 см.

Можно купить специальный арочный профиль для создания криволинейного потолка. Вспомогательный каркас стоит выполнять по уровню, для этого можно натянуть нитку по плоскости. Как только установлены основные профили, можно приступить к установке промежуточных профилей.

Для этого стоечный профиль нарезается на отрезки по 50 см, которые впоследствии устанавливаются в промежутки между основными составляющими конструкции, поперек, и прикручиваются маленькими саморезами «семечками». В видео показан процесс монтажа многоуровневого потолка.

Советуем посмотреть видео: монтаж многоуровневого потолка.

Вернуться к оглавлению

Крепление листов гипсокартона

Каркас готов, можно начать крепить к нему гипсокартон. Вначале обустраивается первый уровень. Если предусмотрена волна на потолке, то ее нужно вырезать еще на полу, только сделать ее с припуском в 1-2 сантиметра, их можно подрезать на месте строительным ножом.

Гипсокартон не крепится впритык к стене, нужно оставлять зазор примерно в сантиметр. Если предусмотрена подсветка на первом уровне, то нужно проделать отверстия при помощи дрели со специальной насадкой «коронкой».

Как только зашит первый уровень, приступаем к формированию боковых частей второго яруса. Для этого раскроить гипсокартон с небольшим припуском. Если конструкция криволинейная, то гипсокартонные полосы нужно будет гнуть. Сделать это просто, если намочить его с двух сторон.
Чтобы этот процесс проходил быстрее и легче, полосы гипсокартона прокатывают игольчатым валиком с двух сторон. Затем смочить отрезок и подождать.

Применение игольчатого валика для сгибания гипсокартонного листа

Благодаря этой процедуре гипсокартон станет мягким и податливым. Начинать прикручивать нужно от стены, аккуратно сгибая полосу и сразу прикручивая ее саморезами, шагом 15 см, как только боковые сторона сформированы, можно подрезать их по каркасу.

Перед тем как вырезать в гипсокартоне отверстия под светильники, нужно дать гипсокартону просохнуть. На последнем этапе зашивается второй ярус потолка листами ГКЛ.

Важно! Начиная монтаж многоуровневого потолка из гипсокартона своими руками нужно помнить, что больше трех уровней делать не рекомендуется. Во-первых, потолок в зале опустится очень низко, во-вторых, увеличится стоимость конструкции, и в-третьих, удельный вес потолка будет очень большим, что не желательно.

Смотрите в видео: сборка многоуровневого гипсокартонного многоуровневого потолка.

Вернуться к оглавлению

Подсветка в многоуровневых потолках

Подсветка на потолок в зале обустраивается специальными материалами, по трем основополагающим технологиям:

  • неоновая;
  • светодиодная;
  • дюралайтовая.

При составлении дизайна многоуровневых потолков из гипсокартона также применяется и классический вариант – люстра на потолке с несколькими рожками, или точечные светильники. От предпочтений хозяина помещения зависит вид подсветки.

При помощи дюралайтовых трубок можно подсветить не только потолок в зале, но и некоторые элементы декора для стен. Недостатком данной подсветки является только ее цена.

  • Светодиодная подсветка применяется как в светильниках, так и в ленте, которую пропускают по периметру комнаты, получая при этом эффект парящей конструкции. Светодиодная лента может быть трех цветов: синяя, красная и белая.Установленная светодиодная посветка на многоуровневом потолке из гипсокартона

    C грамотным применение сочетаний цветов, можно получить великолепный эффект в квартире. Есть небольшой минус – ленту нужно защищать от повреждения;

  • Неоновая подсветка в зале – благодаря ей можно воссоздать даже звездное небо на потолке, так как в арсенале подсветок, есть трубки, которые подсвечиваются только на концах. Несмотря на кажущуюся простоту, не стоит устанавливать этот вид освещения самостоятельно, обратитесь к профессионалам. Неоновая подсветка работает очень долго, в отличие от дюралайта.

Потолок для кухни устанавливается в несколько этапов, которые были описаны выше.

Дизайн кухни с многоуровневым потолком и подсветкойВернуться к оглавлению

В заключении

Прежде чем приступать к установке многоуровневой конструкции для кухни, оцените свои силы и возможности. Если сомневаетесь, что не сделаете все правильно, то пригласите профессионалов, которые качественно выполнят работу.

Прайс-лист на Гипсокартонные работы в Москве. Цены на монтаж гипсокартона на 2021 г.

Расценки на монтаж гипсокартона – Наше предложение

Сервис Lider Uslug представляет доступный прайс-лист на гипсокартонные работы от частных гипсокартонщиков зарегистрированных на нашем сайте. Специалисты быстро и качественно поставят межкомнатные перегородки, выровняют стены и потолки, а вы при этом заплатите на 30-40 % меньше, чем при обращении в официальные ремонтные компании.

Наш прайс в Москве – один из самых доступных. Потому что:

  • мастерам выгодно не поднимать цены – их чаще выбирают и рекомендуют в качестве исполнителей;
  • администрация нашего ресурса требует соблюдения ценовых рамок на выполняемые услуги;
  • стоимость работ и рейтинг гипсокартонщика взаимосвязаны – чем ниже тарифы, тем выше показатель и больше заказов.

Чтобы рассчитать примерную стоимость ремонта, изучите наш прейскурант на гипсокартонные услуги. Представленные сайтом цены 2021 остались такими же низкими, как и в 2020 году, что дает нашим клиентам возможность выполнить ремонт бюджетно, без лишних расходов.

Представленный прайс-лист полностью отражает нашу принципиальную позицию – недорого и выгодно для заказчиков. Именно поэтому мастера, зарегистрированные ресурсом, никогда не сидят без дела. Они востребованы всегда.

Как формируется прайс-лист на работы гипсокартонщика

Прейскурант цен на гипсокартонные работы, который вы видите на сайте, составляется, исходя из личных расценок мастеров сервиса. Стоимость услуг рассчитывается как усредненное значение и представляет собой приблизительную величину, которая позволяет примерно определить сумму оплаты исполнителям. Даже такой приблизительный расчет дает возможность понять, что монтаж гипсокартона специалистами ресурса гораздо выгодней, чем обращение в специализированные организации.

Если вас интересуют услуги гипсокартонщика дешевле, чем в других местах Москвы, Московской области, рекомендуем оформить заявку в Lider Uslug. Экономичный прайс-лист на гипсокартонные работы наверняка вас заинтересует. Почему бы этим не воспользоваться…

виды и размеры, особенности применения профиля

Главная / Статьи / Профили для гипсокартона

 

 

Гипсокартон относится к наиболее востребованным отделочным материалам. Он позволяет быстро и эффективно выровнять стены, создать многоуровневый потолок, внутрикомнатные перегородки и т. д. Монтаж гипсокартонных листов производится на каркас, собранный из специальных металлических профилей. От того, насколько правильно подобран материал и комплектующие, зависит качество всей конструкции. Гипсокартон может устанавливаться и без каркаса. В таком случае крепление листов осуществляется с помощью специального клея. Чаще всего это делается:

  • если базовая поверхность не требует выравнивания;
  • когда малый вес конструкции является принципиальным.

Для изготовления профиля для гипсокартона используется листовая сталь толщиной 0,25–0,6 мм . Ее верхний слой покрыт цинком. Такая защита повышает устойчивость к коррозии и делает изделия более долговечными. Производители предлагают несколько видов профилей, позволяющих создавать каркасы для гипсокартонных конструкций любой сложности. Элементы подбираются в соответствии с их функцией и расположением.

Особенности изготовления профилей для гипсокартона

В качестве основного материала используется штрипс – оцинкованная рулонная лента из стали толщиной до 0,6 мм. Такая металлическая полоса подается на прокатный станок, где ей придают сечение требуемой формы. Полученный профиль нарезается на части нужной длины. Настройка размеров производится единожды, перед началом работы, затем процесс осуществляется автоматически. При производстве используется следующее оборудование:

  • гибочный станок. Формирует необходимое сечение профиля;
  • гильотина. Нарезает полученную заготовку на части;
  • автоматическая система контроля. Проверяет размеры полученных заготовок.

Основным нормативным документом, регламентирующим характеристики и размеры профилей, является ГОСТ 11474-76. Многие отечественные предприятия изготавливают данную продукцию в соответствии с ТУ 1122-001-70890834-2009. Все профили для обшивки гипсокартона делятся на шесть основных категорий. Четыре из них — основные, предназначенные для сборки конструкции, и две — вспомогательные.

Виды и обозначение профилей для гипсокартона

  • Направляющие для сборки каркаса. Такие профили обозначаются UW или ПН (в зависимости от производителя — отечественного или зарубежного). Стандартная глубина составляет 40 мм. Ширина может быть различной и подбирается в соответствии с конструкцией. Основное назначение данного профиля для гипсокартона — быть направляющей для крепления последующих элементов, например стоечных. Применяется при сборке каркасов стен и перегородок.
  • Потолочные направляющие. Маркируются обозначениями ППН, ПНП или UD. Профили данной категории имеют те же функции, что и предыдущие. Они монтируются по периметру потолка и являются направляющими для других элементов каркаса. Такие профили для гипсокартона часто применяются для создания многоуровневых конструкций. Глубина потолочного направляющего элемента, как правило, составляет 27 мм.
  • Стоечные профили. Они предназначены для вертикальной установки, например при создании перегородок из гипсокартона или при облицовке стен. Элементы крепятся к направляющему профилю. В зависимости от производителя они маркируются как ПС или СW. Стоечный элемент должен выдерживать нагрузку на сжатие, поэтому дополнительно укреплен ребрами жесткости.
  • Потолочные профили. Они имеют обозначение CD или ПП. Профили крепятся к потолку на прямом подвесе или при помощи анкерного зажима. Глубина — 27 мм, ширина может быть различной. Такие элементы составляют основной каркас подвесного потолка из гипсокартона.

Помимо перечисленных изделий, в работе с гипсокартоном используются также угловые и арочные профили. Первые устанавливаются на стыке стен. Они предназначаются для выравнивания углов и придания им точных геометрических очертаний. Угловой профиль может быть как сплошным, так и перфорированным. Второй вариант обеспечивает лучшее сцепление с отделочным материалом. Арочный профиль предназначен для создания криволинейных конструкций из гипсокартона. Он применяется в оформлении многоуровневых потолков сложной формы, для изготовления ниш, внутренних перегородок, дверных и оконных проемов нестандартной формы. Арочный профиль выпускается как с вогнутой, так и с выпуклой поверхностью.

Если перед установкой каркаса требуется оштукатуривание стены, используются специальные маячки. Этот элемент не является профилем для гипсокартона. Его задача — обеспечить ровное нанесение рабочего раствора. Маячки закрепляются вертикально с шагом 20–30 см, с проверкой направления по отвесу. Их использование помогает получить ровную поверхность с перепадом уровней не более 5 мм.

Помимо перечисленных профилей для гипсокартона, при создании каркаса используются вспомогательные комплектующие, например специализированный крепеж. Он прост в эксплуатации и позволяет значительно сократить время монтажа.

Виды крепежа для гипсокартонных конструкций

  • Двухуровневый соединитель СD. Предназначается для скрепления соответствующих профилей перпендикулярно друг другу. Соединение осуществляется специальными саморезами. Изделия располагаются на различной высоте.
  • Одноуровневый соединитель CD. Он закрепляет профили, расположенные на одной высоте под прямым углом. Второе название такого соединителя — «краб». При небольшой нагрузке на конструкцию (до 20 кг/м2) саморезы не понадобятся, достаточно защелкнуть профили.
  • Прямой подвес CD. Основная сфера применения изделия — монтаж гипсокартонных потолков. Такой подвес способен выдержать нагрузку до 40 кг. Элемент устанавливается на поверхности потолка. Перед присоединением к профилю его изгибают в виде буквы П, после чего закрепляют саморезами.
  • Анкерный подвес (с тягой). Он присоединяет СD-профиль к поверхности потолка. Элемент применяется тогда, когда длины прямого подвеса не хватает. Максимальная нагрузка составляет 25 кг. Крепеж вставляют в профиль, а тягу продевают через специальные отверстия в пружине.
  • Продольный соединитель. Используется, чтобы удлинить СD-профиль для гипсокартона. Продольный соединитель вставляется с торцевой стороны, после чего закрепляется саморезами.

Крепеж для гипсокартонных конструкций рекомендуется приобретать одновременно с профилями в тех же строительных магазинах. Желательно, чтобы продукция была изготовлена одним и тем же производителем.

Подвесной потолок из листов Knauf

Перегородка с обшивкой из КНАУФ-листов

Отделка стен гипсокартоном КНАУФ

Монтаж гипсокартона любой сложности в Санкт Петербурге и ЛО.

Наша команда профессионалов выполнит работы по гипсокартону любой сложности и конфигурации. Многоуровневые потолки, перегородки, декоративные изделия, выравнивание стены из гипрока, откосы, арки, ниши и многое другое, а также в услуги входит шпаклевание и электромонтаж.

Мы знаем как качественно и быстро выполнить монтаж гипсокартона.
Развивая данное направление, мы накопили огромный опыт, а цены на услуги и строительный материал вас приятно удивят.

Монтаж гипсокартона

Работаем по вашим чертежам, эскизам и фото, а также готовы предложить свои наработки или услуги дизайнера. Выезд специалиста, на объект бесплатный. Гарантии.

Основные преимущества, почему Вам следует выбрать именно нас:

  • Работаем БЕЗ ПРЕДОПЛАТЫ
  • Квалифицированные монтажные бригады (не наем)
  • Честность: не брать дороже, чем стоит; не чинить, если ремонт не нужен
  • Делаем быстро, вовремя и правильно
  • Гарантийное и сервисное обслуживание
  • Мы любим свою работу
  • Умеренная цена за высокое качество
  • Уникальное предложение! Только у нас (о нем вы узнаете при встрече с технологом)

Вы можете сделать заказ у наших специалистов на стены из гипрока, потолки из гипрока, установка перегородок и другие виды услуг. С ценами можно ознакомиться тут. Звоните на номер +7 (812) 409-90-29  или пишите на почту  [email protected]
Мы ВКонтакте и в Одноклассниках

Как неправильно делать монтаж гипсокартона


Вот видео из просторов интернета, многие могли учится по нему, но оно нам показывает как производить монтаж стен категорически нельзя. Видно, что даже саморез используются по дереву, поэтому он, при полном повороте стал проворачиваться. Сегодня многие фирмы делают установку некачественно и неправильно, поэтому доверьтесь профессионалам — обращайтесь к нам!

Немного о данном материале:
Уже давно на различных строительных площадках ГКЛ стал часто и активно использоваться. Этот практичный, очень простой в работе, и недорогой материал применяется для изготовления стен, к примеру, для выравнивания перед укладкой кафеля, также для устройства коробов, межкомнатных перегородок, многоуровневых потолков, и другие работы.

На данный момент существует 3 основных вида: (ГКЛВ) влагостойкий, (ГКЛ) обычный и (ГКЛО) огнестойкий.

Первый вид предназначен для работ в помещениях, где имеется повышенная влажность или повышенное содержание паров воздухе (например, в сан.узлах). (ГКЛ) Обычный вид является самым дешевым вариантом, по качеству уступает другим видам, но имеет одну цену с влагостойким. Огнестойкий используется в отделке каминов и других мест, где находится открытый источник огня. Также стоит отметить гипсоволокнистый лист ГВЛ, он является самым прочным.

Гкл является экологически чистым и безопасным, он имеет хорошие звуко и теплоизоляционные свойства. Данный материал не горит и является огнестойким, также имеет способность «дышать»: при наличии избытка влаги в воздухе, он начинает её поглощать, и сам отдает влагу, если тот сухой. При монтаже гипсокартона это является огромным преимуществом, ибо климат в нашей стране очень изменчив, это дает естественную регуляцию микроклимата и дает жилищу гармоничную атмосферу.

При возведение стен и межкомнатных перегородок данный строительный материал считается идеальным. Данный способ дает возможность сделать перепланировку в квартире быстро, легко и недорого. Ведь не секрет, что на строительном рынке, gipsokarton является самым популярным и ходовым товаром, за счет того, что гипсокартонные листы легко режутся и гнутся, а также удобны в дальнейшем обработке, например, отделочных работах. Установка гипсокартона фирмы кнауф является правильной и качественной, а при обшивке листы Гкл не трескаются и не ломаются, также желательно использовать профили данной фирмы, где можно выбрать нужную толщину профиля.

 

Плюсы и минусы монтажа и установки гкл.

Перечислим здесь основные преимущества:

  1. Легкость и быстрота монтажа/демонтажа гипсокартона очень сильно экономит ваше время;
  2. Стоимость перегородок намного меньше, чем возведение стен из кирпича или других тяжелых и дорогих материалов, также стена намного меньше капитальной стены из кирпича;
  3. При правильном утеплении имеет отличную звуконепроницаемость;
  4. При возведении стен не используются мокрые работы, что удобно при работающем офисе или помещении, где живут люди.
Статьи по теме:

Цена на монтаж гипсокартона
Монтаж гипсокартона на стены
Монтаж подвесного потолка из гипсокартона
Монтаж двухуровневого потолка из гипсокартона
Цена на монтаж потолков из гипсокартона
Монтаж каркаса под гипсокартон
Монтаж гипсокартона в деревянном доме
Монтаж короба из гипсокартона

Примеры работ

Работы на Космонавтов 65, потолки под ключ с подсветкой 50 кв м и звукоизоляцией. Ссылка на полный объект http://vk.com/album-46415860_192229152 Большой заказ на Турунхановых островах 8. Перегородки из ГКЛ, сложные потолки, офис на 320 кв м. Готовится видео отчет по данному заказу. Ссылка на объект в контакте http://vk.com/album-46415860_172003180 Центр

CE — Координационные услуги в сложной плоскости потолка

Эти требования становятся более строгими в зонах, подверженных серьезной сейсмической активности, согласно CISCA, которая дает рекомендации по установке потолка. В соответствии с Международным строительным кодексом (IBC) категории сейсмических зон D, E и F кабельные лотки и электрические каналы должны иметь независимые опоры и распорки, даже несмотря на то, что потолки обычно используют усиленную решетку с настенными креплениями и удерживающими тросами.Если перегородки и колонны проходят через потолки площадью более 2500 квадратных футов, они должны иметь сейсмически разделительные швы, или перегородки должны быть полной высоты, доходя до несущей конструкции наверху. Если потолки не имеют жестких распорок, в конструкции должны быть предусмотрены накладные кольца увеличенного размера для оросителей и других проходов.

Спринклеры и спасательное оборудование — особый случай. Рекомендация Национальной ассоциации противопожарной защиты NFPA 13 «Стандарт установки спринклерных систем » предусматривает два пути решения для вспомогательных систем пожаротушения.Один из способов — использовать предписания и таблицы в главе 9 «Подвешивание, фиксация и ограничение системного трубопровода», что может быть выполнено без инженерного анализа. В качестве альтернативы, проектная группа может использовать ключевые принципы пожарной безопасности, изложенные в этой главе, вместе с табличными данными о расстоянии между подвесами; например, все элементы подвески должны быть из железа, и в каждой точке опоры они должны иметь размер, позволяющий выдерживать, по крайней мере, пятикратный вес труб (когда они заполнены) плюс запас в 250 фунтов.Если компетентные органы (AHJ) требуют этого, группа должна также подготовить расчеты, показывающие напряжения и коэффициенты безопасности, принятые для всех длин труб, подвесов и фитингов.

2. Доступ и обслуживание в камере статического давления. Необходимость доступа к статическому пространству для обслуживания резко возросла в последние годы. По словам инженеров-проектировщиков Cisco, растущее использование беспроводных локальных сетей (WLANS) является одним из факторов давления. «Из-за быстрого распространения новых сетевых устройств и приложений, — говорят они, — количество устройств и подключений на пользователя неуклонно растет.«У большинства пользователей есть основной компьютер и, по крайней мере, еще одно интеллектуальное устройство, что« приводит к резкому увеличению плотности пользователей ».

Устройства и кабели

WLAN, как и другие компоненты информационных технологий и телекоммуникаций (IT&T), требуют частого обновления, программирования, обслуживания и замены. Наряду с другим текущим обслуживанием систем освещения, MEP и противопожарной безопасности требуется более высокая частота доступа, требующая большего использования мощных решетчатых систем, потолочных плит с повышенной прочностью и исправных систем навесных панелей.Во всех случаях многие владельцы зданий и арендаторы предпочитают иметь запасные плитки и панели для быстрой замены поврежденных участков потолка.

3. Движение и колебания в камере. Вибрации от механического оборудования, аудиовизуальных продуктов, таких как проекторы, и других систем, используемых в системах, могут распространяться от камеры статического давления вдоль конструкции, опор потолочной решетки, а также через хомуты и приспособления. Основным результатом вибрации является фоновый шум, часто усиливаемый полостью приточного воздуха, которая имеет естественный резонанс, аналогичный внутренней части барабана.Сконструированные подложки и изоляционные элементы развязки, такие как неопреновые прокладки, можно использовать с потолочными подвесками, настенными скобами или напольными опорами, чтобы уменьшить нежелательные вибрации и шум.

4. Интеграция системы освещения. По данным группы Windows & Daylighting Национальной лаборатории Лоуренса Беркли (LBL), главной проблемой для систем освещения является растущее желание использовать комбинированное прямое / непрямое освещение для уменьшения бликов и соответствия распределению дневного света.«Эти системы требуют чистого потолка с высоким коэффициентом отражения и соответствующей высоты», — согласно LBL, сообщая, что высота потолка должна быть более 9 футов с подвесками, подвешенными не менее чем на 1,5 фута от потолка. Кроме того, потолочная система должна позволять правильное расположение светильников в соответствии с распределением дневного света, при этом схемы освещения должны располагаться в зонах, отражающих расположение окон.

Кроме того, LBL предупреждает проектные группы: «Предупреждайте потенциальные конфликты на раннем этапе», в том числе плохое освещение, «расположение, доступ и переполненные потолочные камеры.«В качестве другого примера, осветительные приборы и регистры подачи / возврата должны быть скоординированы и расположены так, чтобы не нарушать воздушный поток в системе отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха», — говорит LBL. Группа рекомендует включать планы калибровки и технического обслуживания в строительную документацию в ясном и удобном пакете.

5. Низковольтные системы (системы безопасности, аудио). Кроме того, в здание встроено несколько низковольтных систем, для которых требуется доступ через подвесной потолок или за ним.Галогенное и ксеноновое освещение с питанием от 12 или 24 В все чаще используется в магазинах, музеях, ресторанах и отелях, часто на дорожках, проходящих через решетку подвесного потолка. В этих системах есть трансформаторы, которые производят шум и тепло, а также толстые провода, которые проводят много электричества.

Некоторые потолочные системы имеют встроенную служебную зону для координации обслуживания, которая поддерживает эстетическую целостность во всей плоскости потолка.

Фото любезно предоставлено Hunter Douglas Contract

Лил Уэйн раскрывает подробности «No Ceilings 3» и объявляет дату выхода

Mixtape Уэйн возвращается на этой неделе.

Спустя пять лет после выпуска No Ceilings 2, Лил Уэйн планирует возродить свою классическую серию микстейпов. Complex может эксклюзивно объявить, что в эту пятницу, 27 ноября, он выпустит No Ceilings 3 на DatPiff.

«Игра микстейпа казалась умирающим искусством, и, поскольку я один из пионеров этого ремесла, и она сыграла такую ​​большую роль в моей карьере, я чувствовал, что было правильным воскресить ее», — говорит Лил Уэйн. Сложный. «Кроме того, здесь много песен, я хотел убить свой путь!»

DJ Khaled, ведущий микстейпа, в среду во второй половине дня анонсировал песни проекта. «Они всегда пытаются поставить потолок нашего величия, поэтому мы сняли этот гребаный потолок», — сказал Халед в начале клипа, который он загрузил в Instagram, прежде чем проиграть отрывок из стихотворения Дрейка, который будет на пленке.Он также анонсировал новый фристайл Уэйна поверх Lil Baby и песни 42 Dugg «We Paid».

После того, как Уэйн столкнулся с ответной реакцией из-за своего спорного решения встретиться с Дональдом Трампом перед президентскими выборами, внимание Уэйна на данный момент сместилось на выпуск новой музыки. В ознаменование выпуска No Ceilings 3, он работал с тремя артистами над созданием трех разных обложек микстейпов.

HustleGrl, создавший обложку для первого микстейпа No Ceilings в подростковом возрасте, снова соединился с Уэйном для одной из трех обложек (см. Выше).«Работа с Уэйном спустя годы заставила меня почувствовать ностальгию», — говорит она Complex. «Я помню, как мне было 17 лет, и я разработал для него первую обложку No Ceilings ; такое же волнение и стремление убить его присутствует сегодня. С тех пор мой стиль дизайна изменился, и я хотел создать что-то знаковое для влиятельного художника, которым он является. Мне нравится работать с кем-то вроде Лил Уэйна, потому что я всегда получаю творческую свободу, которая всегда дает наилучшие возможные результаты ».

Размышляя о процессе, она добавляет: «На этот раз я была так же взволнована, как и первый раз, когда мне позвонили по проекту No Ceilings .Лил Уэйн работает над новым микстейпом, и, конечно же, вселенная снова выровняла наши творческие пути. Такой звонок мгновенно заставит ваш мозг работать. Мне не терпелось использовать новые техники и стили, которым я научился с тех пор, как в последний раз работал с ним. Я очень рад быть частью переиздания Уэйна и с нетерпением жду возможности поделиться нашей работой со всем миром ».

Густаво Зерменьо-младший, известный в арт-сообществе как gz.jr, чувствует то же самое. Сделав себе имя в Лос-Анджелесе своими культовыми фресками, он ухватился за возможность поработать с Уэйном.Говоря об опыте создания обложек (см. Выше), Густаво говорит Complex: «Когда я рос, я все еще помню, когда Уэйн сбросил No Ceilings. Я всегда был поклонником его музыки, поэтому возможность работать с ним над дизайном обложки для No Ceilings 3 действительно стала для меня моментом полного цикла. Я надеюсь, что его поклонникам понравится обложка так же, как мне понравилось ее создавать и воплощать в жизнь ».

ABH, создавший одну из обложек, добавляет: «Уэйн — КОЗА, период, так что иметь возможность показать его художественно в классическом проекте, таком как No Ceilings , — это чертовски честь.И я был в туре с ним в молодости, так что для меня это также полный цикл ».

Пока вы ждете No Ceilings 3 , который поступит на DatPiff в эту пятницу, вы можете прослушать предварительный просмотр некоторой музыки ниже.

Время полужизни взаимодействия Т-клеточный рецептор / пептид-главный комплекс гистосовместимости может модулировать активацию Т-клеток в ответ на бактериальную инфекцию. ) родственными комплексами пептид – главный комплекс гистосовместимости (pMHC) на поверхности антигенпрезентирующих клеток (APC).Предыдущие исследования предоставили доказательства, подтверждающие представление о том, что период полужизни взаимодействия TCR / pMHC и плотность pMHC на APC являются двумя параметрами, которые могут влиять на активацию Т-клеток. Однако остается неизвестным, может ли время полужизни взаимодействия TCR / pMHC модулировать активацию Т-клеток в ответ на заражение патогеном. Чтобы подойти к этому вопросу, мы создали штаммы бактерий, экспрессирующие варианты антигена овальбумина (OVA), несущие точечные мутации в последовательности SIINFEKL.При связывании с H-2K

b этот пептид является родственным лигандом для OT-I TCR. Варианты H-2K b / SIINFEKL связываются с OT-I TCR с различными периодами полураспада. Здесь мы показываем, что дендритные клетки (ДК), инфицированные бактериями, экспрессирующими варианты OVA, были неспособны активировать Т-клетки OT-I, когда период полужизни взаимодействия TCR / H-2K b / OVA был чрезмерно коротким. В соответствии с этими данными, активация Т-клеток наблюдалась только у мышей, инфицированных бактериями, экспрессирующими варианты OVA, которые связывались с OT-I с периодом полужизни выше определенного порога.Вместе взятые, наши данные предполагают, что период полужизни взаимодействия TCR / pMHC может значительно модулировать активацию Т-клеток in vivo , а также влиять на распознавание антигенов, экспрессируемых бактериями. Эти наблюдения подчеркивают важность периода полужизни TCR / pMHC для выведения патогенов.

Ключевые слова: дендритные клетки , главный комплекс гистосовместимости, Т-клетки, рецепторы Т-клеток

Введение

Активация Т-клеток является важным событием, необходимым для инициации адаптивного иммунитета против инфекционных агентов, которое зависит от взаимодействия между рецептор Т-клеток (TCR) и комплекс пептид-главный комплекс гистосовместимости (pMHC) на поверхности антигенпрезентирующих клеток (APC). 1 3 Считается, что активация наивных Т-клеток требует, по крайней мере, двух одновременных активирующих сигналов от APC. 4 7 Первый сигнал обеспечивается взаимодействием TCR / pMHC и определяет специфичность активации T-клеток на основе распознавания TCR конкретного комплекса pMHC на поверхности APC. 1 , 3 , 8 11 Природа ответа Т-клеток модулируется кинетикой связывания между комплексом pMHC и TCR. 10 , 12 14 Второй сигнал обеспечивается костимулирующими молекулами, которые присутствуют на поверхности APC, такими как CD80 (B7.1), CD86 (B7.2) и CD40. Эти молекулы взаимодействуют со своими соответствующими лигандами, CD28 и CD40L, экспрессируемыми Т-клеткой. 4 7 , 15 17 В то время как вторые сигналы постоянны и показывают незначительную вариабельность в аминокислотной последовательности, высокое разнообразие последовательностей, демонстрируемое молекулой TCR, имеет решающее значение для признание большой вселенной комплексов pMHC.Соответственно, понимание модуляции функции Т-клеток кинетикой связывания TCR / pMHC является фундаментальным для стимулирования эффективного адаптивного иммунного ответа против патогенов.

Чтобы вызвать эффективную активацию Т-клеток, взаимодействие TCR / pMHC должно удовлетворять нескольким кинетическим требованиям. 3 , 10 , 12 , 14 , 18 22 Период полураспада взаимодействия TCR / pMHC должен быть выше определенного порога, чтобы позволить продуктивная передача сигналов TCR, как первоначально было предложено кинетической моделью корректуры. 12 , 13 Несколько исследований предоставили доказательства, подтверждающие это понятие, показывая, что лиганды pMHC с чрезмерно коротким периодом полураспада не могут завершить сигнальный каскад, необходимый для активации Т-клеток. 23 26 Кроме того, Т-клетки должны быть активированы лигандом, который в физиологических условиях обычно имеет низкую плотность на поверхности APC. 27 , 28 Было показано, что внутриклеточные патогены развили молекулярные механизмы, чтобы избежать распознавания Т-клетками за счет уменьшения плотности молекул MHC, загруженных пептидами, производными от патогенов, на поверхности инфицированных клеток. 29 32 Соответственно, устойчивая передача сигналов TCR, необходимая для активации наивных Т-клеток, должна генерироваться несколькими родственными комплексами pMHC на поверхности APC. Лиганд с низкой плотностью накладывает ограничение, заключающееся в том, что период полужизни связывания TCR / pMHC должен быть достаточно коротким, чтобы одна молекула pMHC могла последовательно взаимодействовать с несколькими молекулами TCR. Было высказано предположение, что последовательное включение TCR приведет к устойчивой передаче сигналов и позволит эффективную активацию Т-клеток. 14 , 21 , 22 , 33 Выполнение требований кинетической корректуры и последовательного включения TCR потребует наличия оптимального периода полужизни TCR-pMHC для эффективных Т-клеток. активация. 10 , 18 , 34 Данные, подтверждающие это понятие, получены из нескольких независимых экспериментальных систем, в которых было замечено, что как укороченное, так и продолжительное взаимодействие TCR с помощью pMHC может быть вредным для активации Т-клеток. .В то время как короткие периоды полужизни будут препятствовать завершению передачи сигналов TCR, более длительные периоды полужизни будут препятствовать последовательному вовлечению TCR, ограничивая количество молекул pMHC, доступных для каждого TCR. Биологическое значение ингибирования активации Т-клеток за счет расширенного взаимодействия TCR / pMHC выявлено отсутствием значительного созревания аффинности во время ответов Т-клеток на вирусные инфекции 35 , а также наблюдением, что клоны Т-клеток, экспрессирующие высокий уровень -аффинные TCR демонстрируют нарушение активации и функции. 36 , 37

Хотя важность периода полужизни взаимодействия TCR / pMHC в активации Т-клеток была четко установлена, большая часть данных получена из исследований in vitro с гибридомами Т-клеток. и клеточные линии в виде APC, обработанных экзогенными синтетическими пептидами. 10 , 19 , 23 , 25 , 26 , 34 , 38 Т-клеточные гибридомы не зависят от костимуляции и в большинстве случаев не проявляют эффекторной активности.Следовательно, остается неизвестным, может ли кинетика связывания взаимодействия TCR / pMHC модулировать активацию Т-клеток in vivo в ответ на заражение патогеном.

В этом исследовании мы подошли к вопросу о том, как период полужизни взаимодействия TCR / pMHC может влиять на активацию Т-клеток в ответ на бактериальную инфекцию. С этой целью мы создали несколько штаммов вирулентного или аттенуированного Salmonella enterica , серовара typhimurium ( S. typhimurium ), экспрессирующих овальбумин дикого типа (OVA) или мутантные варианты этого белка, несущие точечные мутации в последовательности SIINFEKL. .При связывании с H-2K b этот пептид является родственным лигандом для OT-I TCR, очень хорошо охарактеризованной системы TCR / pMHC. Варианты H-2K b / SIINFEKL, содержащие замены одной аминокислоты, связываются с OT-I TCR с разными периодами полураспада. В этой системе мы наблюдали, что период полужизни взаимодействия TCR / pMHC определяет, активируются ли Т-клетки APC, инфицированными бактериями. Мы показываем, что in vitro , а также in vivo , активация трансгенных Т-клеток OT-I запускалась только бактериями, экспрессирующими варианты OVA, которые продуцировали лиганды pMHC, которые связывались с TCR OT-I с периодом полураспада, эквивалентным лиганда дикого типа.Наши данные подчеркивают важность периода полужизни взаимодействия TCR / pMHC для инициации Т-клеточных ответов, необходимых для выведения патогенов.

Результаты

Генерация мутантов OVA A2, E1, G4 и K4

Чтобы оценить, может ли период полужизни взаимодействия TCR / pMHC модулировать активацию Т-клеток в ответ на бактериальную инфекцию, мы использовали сайт-направленный мутагенез для четыре различных варианта белка OVA путем введения замен одной аминокислоты в эпитоп SIINFEKL плазмиды pOVA.Созданные мутанты OVA были сконструированы OVA-A2 ( I258A ), OVA-E1 ( S257E ), OVA-G4 ( N260G ) и OVA-K4 ( N260K ) (). Все мутации подтверждали секвенированием каждой кодирующей последовательности OVA (данные не показаны). Эти мутации были отобраны на основе предыдущих исследований 24 , 45 , 46 , в которых были охарактеризованы функциональные и связывающие свойства для каждого из измененных пептидных лигандов, производных SIINFEKL ().Комплекс H-2K b / SIINFEKL является родственным агонистом-лигандом OT-I TCR. Варианты одной аминокислоты H-2K b / SIINFEKL связываются с разными периодами полужизни с TCR OT-I и вызывают различные функциональные ответы на T-клетках OT-I (). 24 , 25 , 47 Для экспрессии каждого из этих измененных пептидных лигандов на бактериях мы трансформировали штамм S. typhimurium дикого типа 14028s (ST) 30 или аттенуированный штамм S.typhimurium (ST-aroA) 48 , 49 с плазмидами, упомянутыми выше. Все трансформированные штаммы ST и ST-aroA экспрессировали эквивалентные количества OVA () и показали сходные скорости роста в культуре (). Хотя влияние на активацию OT-I T-клеток каждой из этих одиночных аминокислотных замен было тщательно проанализировано in vitro , некоторые расхождения остаются. 25 , 45 , 46 , 50 Кроме того, остается неизвестным, как эти изменения связывания TCR / pMHC и активации Т-клеток влияют на распознавание in vivo экспрессируемых бактериями антигенов.Чтобы подойти к этому вопросу in vitro и in vivo , мы оценили, активируются ли Т-клетки OT-I в ответ на ДК с импульсами ST и ST-aroA, экспрессирующими либо OVA, несущие последовательность SIINFEKL дикого типа, либо мутанты OVA, несущие замены одной аминокислоты, описанные выше.

Характеристика штаммов Salmonella typhimurium , трансформированных вариантами pOVA. Вестерн-блоттинг штаммов ST (a) и ST-aroA (b), трансформированных вариантами pOVA и pOVA, показывает, что все штаммы экспрессируют эквивалентные количества белка OVA.В качестве контроля нагрузки экспрессию OmpC для каждого бактериального штамма оценивали с помощью вестерн-блоттинга. Гистограммы показывают соотношение OVA: OmpC для каждого из штаммов рекомбинантных бактерий ST (a) и ST-aroA (b). Родительские штаммы ST и ST-aroA были включены в качестве контроля. (c, d) Кривые роста штаммов, трансформированных pOVA, показывают, что все трансформированные штаммы имеют сходную кинетику роста по сравнению с нетрансформированными родительскими штаммами.

Таблица 1

Кинетика связывания OT-I TCR / H-2K b для пептидов, полученных из OVA 1

900 G389 G389 G389 Agonist
Пептид Пептидная последовательность

7
Фенотип
OVA SIINFEKL 33 Agonist
A2 SAINFEKL 34 · 7 Agonist
Agonist
G389 Agonist
E1 EIINFEKL 10 · 3 Слабый агонист / антагонист
K4 SIIKFEKL <3 · 5 Нулевой

I Трансгенные клетки OT ДК, инфицированные бактериями, экспрессирующими OVA дикого типа или мутанты OVA A2 и G4

Потому что ST дикого типа может уклоняться от презентации антигена ДК 30 , 51 , 52 мы использовали ST, покрытые специфическими антителами IgG, чтобы направлять бактерии к рецепторам Fcγ (FcγR) на DC.Было показано, что интернализация ST через FcγR восстанавливает представление экспрессируемых бактериями антигенов посредством DC Т-клеткам. 30 После заражения только DC, зараженные покрытыми IgG ST-OVA-дикого типа (WT), ST-OVA-A2 и ST-OVA-G4, были способны активировать Т-клетки OT-I in vitro () . Активация клеток OT-I не наблюдалась, когда DC были инфицированы покрытыми IgG ST-OVA-E1 или ST-OVA-K4 (). Не наблюдалось значительных различий в способности активировать Т-клетки OT-I между DC, инфицированными рекомбинантным ST для OVA или мутантами OVA A2 и G4.Однако постоянно наблюдалось, что DC, обработанные пептидом G4, показали пониженную способность индуцировать секрецию IL-2 Т-клетками по сравнению с DC, обработанными SIINFEKL или пептидами A2 дикого типа (сравните с). Как и ожидалось, DC, инфицированные каждым из мутантных штаммов ST-OVA, были способны активировать трансгенные Т-клетки OT-II (), потому что эпитоп IA b / OVA 323-339 , который распознают эти клетки, не был модифицирован сайт-направленный мутагенез. Различия, наблюдаемые в активации Т-клеток OT-I, показанные мутантами ST-OVA, не были результатом неспособности генерировать комплексы H-2K b / OVA 257-264 на DC.Сборку этих комплексов pMHC на DC, инфицированных покрытыми IgG вариантами ST-OVA-WT или ST-OVA, оценивали с использованием моноклональных антител, специфичных для H-2K b / SIINFEKL (). 43 Как показано на фигуре, плотность комплексов H-2K b / OVA 257-264 существенно не различалась между DC, обработанными импульсным ST-OVA-WT, покрытым IgG, или каждым из ST-OVA, покрытых IgG. варианты. В качестве контроля DCs, обработанные родительским ST, покрытым IgG, которые не экспрессировали OVA, не показали поверхностных комплексов H-2K b / OVA 257-264 ().Антитело может распознавать H-2K b , нагруженный SIINFEKL, а также H-2K b , нагруженный любым из производных SIINFEKL измененных пептидных лигандов, но не нагруженных нерелевантным пептидом (pVSV,). Эти данные подтверждают представление о том, что дифференциальная активация Т-клеток OT-I, показанная на рисунке, является результатом вариаций периода полужизни TCR / pMHC, вносимых мутациями в последовательности SIINFEKL, а не различий в представлении MHC каждого варианта эпитопа OVA.

Только антигены, происходящие от ST-OVA-WT, ST-OVA-A2 или ST-OVA-G4, способны активировать Т-клетки.DC инфицировали вариантами ST-OVA-WT или ST-OVA, покрытыми IgG, в течение 4 часов при MOI 50 и оставляли в культуре на 12 часов. По истечении этого времени бактериальные импульсные DC культивировали совместно с наивными Т-клетками OT-I (a – e) или OT-II (f – j). Активацию трансгенных Т-клеток оценивали по высвобождению ИЛ-2. ДК, обработанные бактериями, покрытыми IgG, ДК, обработанные пептидами вариантов SIINFEKL или pOVA (a – e), ДК, обработанные пептидом ISQAVHAAHAEINEAGR (пептид OT-II) (f – j), ДК, обработанные белком OVA, и ДК, пульсируемые IgG- ST с покрытием, как показано на рисунке.Только DC с импульсами ST-OVA-A2 и ST-OVA-G4 индуцировали активацию T-клеток OT-I с такой же эффективностью, как и DC с импульсами ST-OVA-WT. Напротив, ДК, пульсирующие с покрытым IgG ST-OVA-WT или любым из штаммов варианта ST-OVA, были в равной степени способны активировать Т-клетки OT-II.

Мутации в OVA не влияют на презентацию антигена DC. DC инфицировали покрытыми IgG вариантами ST-OVA-WT или ST-OVA, как описано в, и плотность комплексов H-2K b / OVA 257-264 на поверхности DC определяли с помощью проточной цитометрии.(а) Типичные гистограммы ассоциированной флуоресценции анти-H-2K b / SIINFEKL. Слабая линия на каждой гистограмме представляет DC, пульсирующие ST, покрытые IgG. Сплошной линией показаны импульсы постоянного тока с обработкой над каждой гистограммой. (b) Данные показывают процент клеток CD11c + , положительных по поверхностному H-2K b / OVA 257-264 . * P <0,05; н.у., незначимо (тест Стьюдента t относительно импульсных DC OVA). (c) Данные показывают, что анти-H-2K b / SIINFEKL способен распознавать мутантные пептиды, поскольку DC, подвергнутые импульсному воздействию мутантных пептидов pOVA 257-264 или pOVA 257-264 , демонстрируют эквивалентное окрашивание.В контрольные DC вводили импульс нерелевантного пептида (RGYVYQGL, pVSV, полученный из нуклеокапсида VSV). * P <0,05; н.у., незначимо (тест Стьюдента t относительно импульсных ДК pOVA).

ДК, инфицированные аттенуированным штаммом ST, могут праймировать Т-клетки OT-I только при экспрессии мутантов OVA-WT или OVA A2 и G4

Ранее было показано, что эффективность презентации антигена ДК может быть увеличена за счет нацеливания на антигены к FcγRs. 3 , 30 , 42 , 53 , 54 Потому что плотность pMHC на поверхности DC может модулировать активацию T-клеток и зависимость от взаимодействия TCR / pMHC полужизни 34 было важно исключить возможность того, что FcγR-опосредованное усиление презентации антигена могло влиять на Т-клеточный ответ на каждый вариант OVA.Чтобы исключить эту возможность, мы оценили активацию Т-клеток, вызванную ДК, инфицированными ослабленным штаммом S . typhimuruim , штамм ST-aroA, экспрессирующий либо OVA дикого типа, либо любой из точечных мутантов OVA. Как показано на фиг.1, только DC, инфицированные ST-aroA-OVA-WT, или мутанты OVA A2 или G4, были способны активировать трансгенные Т-клетки OT-I. Эти данные подтверждают мнение о том, что различия в активации Т-клеток, вызванные каждым мутантом, были результатом только изменений периода полужизни взаимодействия между TCR и pMHC.Периоды полужизни для вариантов E1 и K4 ниже порога, необходимого для активации Т-клеток ОТ-I (). Напротив, pMHC, генерируемые вариантами A2 и G4, связываются с TCR OT-I с достаточной стабильностью, чтобы поддерживать продуктивную передачу сигналов TCR (). Примечательно, что DC, обработанные пептидом G4, показали пониженную способность индуцировать активацию T-клеток с помощью OT-I T-клеток по сравнению с DC, обработанными пептидами SIINFEKL или A2 (). В заключение мы заметили, что активация Т-клеток достигается только тогда, когда антигены, экспрессируемые бактериями, генерируют комплексы pMHC, которые связывают TCR с периодом полужизни, превышающим определенный порог.

Различия в активации Т-клеток мутантами OVA не зависят от пути проникновения бактерий. Активацию Т-клеток OT-I с помощью DC, пульсируемых свободными вариантами ST aroA-OVA или ST aroA-OVA, оценивали по высвобождению IL-2, как описано в. DC, нагруженные ST aroA-OVA-A2 и -G4, приводили к активации Т-клеток OT-I с эффективностью, эквивалентной эффективности DC, подвергнутых импульсному воздействию ST aroA-OVA-WT.

Т-клетки OT-I пролиферируют и проявляют эффекторную функцию только тогда, когда мышей инфицированы бактериями, экспрессирующими мутант OVA-WT или OVA-A2

Чтобы оценить, может ли период полужизни TCR / pMHC модулировать активацию Т-клеток in vivo в ответ на бактериальную инфекцию мы измерили пролиферацию адоптивно перенесенных Т-клеток OT-I при инфицировании ST-aroA, экспрессирующими варианты OVA-WT или OVA.Трансгенные Т-клетки получали от мышей OT-I или OT-II, метили CFSE и внутривенно вводили сингенным мышам-реципиентам, как описано ранее. 44 Двадцать четыре часа спустя 10 5 КОЕ ST-aroA, экспрессирующие варианты OVA или OVA, вводили тем же путем, как описано ранее. 55 Через три дня после бактериальной инъекции пролиферацию трансгенных Т-клеток OT-I и OT-II оценивали в селезенках мышей-реципиентов путем разбавления флуоресценции, полученной из маркировки CFSE.В соответствии с нашими данными in vitro , значительная пролиферация Т-клеток OT-I наблюдалась у мышей, инфицированных aroA, экспрессирующими OVA дикого типа, или мутантами OVA A2 и G4 (). Кроме того, Т-клетки OT-I показали небольшую пролиферацию с ST-aroA, экспрессирующим OVA-E1 или OVA-K4. Хотя ST-aroA-OVA-G4 индуцировал несколько меньшую пролиферацию Т-клеток, чем ST-aroA-OVA, это различие не было статистически значимым ().

Только заражение ST aroA-OVA-WT, ST aroA-OVA-A2 или ST aroA-OVA-G4 приводило к активации наивных Т-клеток OT-I in vivo .Мышам C57BL / 6 адоптивно переносили CFSE-меченные трансгенные Т-клетки OT-I и заражали вариантами ST aroA-OVA или ST aroA-OVA. Через три дня после бактериального заражения спленоциты анализировали проточной цитометрией на предмет флуоресценции CFSE на Т-клетках CD8 + . (а) Гистограммы показывают флуоресценцию Т-клеток ОТ-I, происходящую от CFSE. (b) Гистограмма показывает процент пролиферации, вызванной каждой обработкой (см. Материалы и методы) * P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001; п.с., не значимо (тест Стьюдента t по сравнению с наивными мышами). (c) Внутриклеточная экспрессия IFN-γ с помощью OT-I CD8 + CFSE + Т-клеток, показанная на (a). Гистограммы показывают флуоресценцию, производную от IFN-γ, для Т-клеток OT-I (с синхронизацией по CD8 и CFSE). (d) Гистограмма показывает среднюю геометрическую интенсивность флуоресценции сигнала IFN-γ в Т-клетках OT-I, нормализованную относительно мышей, инфицированных ST-aroA-OVA (100%). * P <0,05; ** P <0,01; нс, не значимо (тест Стьюдента t по сравнению с наивными мышами). В скобках показано сравнение мышей, зараженных ST-aroA-OVA и ST-aroA-OVA-G4 (тест Стьюдента t относительно ST-aroA- OVA-инфицированные мыши).

Для оценки эффекторного потенциала Т-клеток OT-I у мышей, зараженных различными бактериальными штаммами, продуцирование IFN-γ этими клетками определяли путем окрашивания внутриклеточных цитокинов (). Как и ожидалось, Т-клетки OT-I у мышей, зараженных ST-aroA-OVA, показали высокую экспрессию IFN-γ (). Заражение ST-aroA-OVA-A2 индуцировало продукцию IFN-γ, эквивалентную продукции бактерий, экспрессирующих OVA дикого типа (). Примечательно, что Т-клетки OT-I от мышей, зараженных ST-aroA-OVA-G4, показали значительно меньшую продукцию IFN-γ, чем мыши, зараженные ST-aroA-OVA ().Эти данные свидетельствуют о том, что увеличение периода полужизни взаимодействия TCR / pMHC не обязательно приводит к усилению эффекторной способности Т-клеток CD8 + в ответ на бактериальное заражение. Наконец, что согласуется с данными о пролиферации, ни ST-aroA-OVA-E1, ни ST-aroA-OVA-K4 не индуцировали значительную продукцию IFN-γ Т-клетками OT-I ().

Как и ожидалось, пролиферация Т-клеток OT-II была эквивалентной независимо от того, экспрессировали ли бактерии OVA дикого типа или мутантного (). Эти результаты, вместе с наблюдениями, сделанными in vitro с инфицированными бактериями DC, подтверждают мнение о том, что период полужизни взаимодействия TCR / pMHC может модулировать активацию Т-клеток в ответ на бактериальную инфекцию.Мы показываем, что только бактериальные штаммы, экспрессирующие варианты OVA, которые генерируют комплексы pMHC, которые связываются с достаточной стабильностью с TCR, способны индуцировать пролиферацию Т-клеток. Однако только OVA дикого типа и варианты A2 с периодами полужизни взаимодействия TCR / pMHC 33 секунды и 34,7 секунд соответственно были способны запускать продукцию IFN-γ. Напротив, варианты OVA с более коротким (K4 и E1) или более длинным (G4) периодом полужизни взаимодействия TCR / pMHC не смогли индуцировать продукцию IFN-γ Т-клетками OT-I.

Мутации, введенные в OVA, не влияют на пролиферацию наивных Т-клеток OT-II in vivo . Мышам C57BL / 6 адоптивно переносили CFSE-меченные трансгенные Т-клетки OT-II и заражали вариантами ST aroA-OVA или ST aroA-OVA. Через три дня после бактериального заражения спленоциты анализировали проточной цитометрией на предмет флуоресценции CFSE на Т-клетках CD4 + . Гистограммы показывают флуоресценцию Т-клеток ОТ-II, происходящую от CFSE. Гистограмма показывает процент пролиферации, вызванной каждой обработкой.

Обсуждение

Хотя несколько отчетов поддерживают идею о том, что период полужизни взаимодействия TCR / pMHC является критическим для активации Т-клеток APC, большинство исследований было выполнено с клеточными линиями in vitro . 10 , 14 , 19 , 25 , 45 , 46 , 56 , 57 Предыдущие работы, выполненные нами обоими и другие группы предоставили доказательства, указывающие на то, что для эффективной активации Т-клеток требуется оптимальный период полужизни для взаимодействия TCR / pMHC. 10 , 11 , 18 , 19 , 23 , 26 , 34 , 57 Согласно этой идее, Активация Т-клеток может быть нарушена взаимодействиями TCR / pMHC с чрезмерно коротким или длинным периодом полураспада. Как было первоначально предложено кинетической моделью корректуры и впоследствии показано экспериментально, чрезмерно короткие периоды полураспада не позволят завершить сигнальные события TCR, необходимые для активации Т-клеток. 12 , 13 Напротив, чрезмерно длительные периоды полураспада будут нарушать последовательное взаимодействие TCR, которое требуется для устойчивой передачи сигналов TCR в ответ на родственный pMHC низкой плотности на поверхности APC. 10 , 22 , 34 , 58 Некоторые патогены мешают сборке комплексов pMHC, несущих пептиды, полученные от патогенов, поэтому для активации Т-клетки должны получить необходимую передачу сигналов TCR от лиганд низкой плотности. 29 32 Считается, что устойчивая передача сигналов TCR достигается за счет вовлечения нескольких молекул TCR индивидуальным комплексом pMHC. 14 , 22 , 56 Этот процесс будет накладывать потолок на период полураспада взаимодействия TCR / pMHC, чтобы предотвратить «засорение» TCR. 10 , 11 , 14 , 18 , 34

Потому что на сегодняшний день большинство исследований, оценивающих влияние периода полужизни взаимодействия TCR / pMHC были выполнены in vitro , оставалось неизвестным, регулируют ли описанные выше кинетические требования также активацию Т-клеток in vivo в ответ на бактериальное заражение.Чтобы подойти к этому вопросу, мы ввели OVA и варианты OVA в вирулентный и аттенуированный (ΔaroA) штамм S. typhimurium . Варианты OVA несли одиночные аминокислотные замены в последовательности SIINFEKL и, следовательно, генерировали комплексы pMHC, которые с разными периодами полужизни связывались с OT-I TCR ().

Из четырех аминокислотных замен, внесенных в эпитоп SIINFEKL, бактерии, экспрессирующие варианты A2 и G4, показали эквивалентную in vitro и in vivo способность активировать OVA-специфические CD8 + Т-клетки по сравнению с теми, которые экспрессируют дикие — типа OVA.Однако in vivo эффекторная функция , измеренная по продукции IFN-γ, наблюдалась только для OVA дикого типа и варианта A2. Бактерии, экспрессирующие вариант G4, показали значительно сниженную способность индуцировать продукцию IFN-γ Т-клетками CD8 + , что свидетельствует о том, что увеличенный период полужизни TCR / pMHC этого варианта нарушает полную эффекторную функцию Т-клеток.

Напротив, инфицирование бактериями, экспрессирующими мутанты OVA E1 и K4, не привело к значительной активации OVA-специфичных трансгенных Т-клеток CD8 + .Хотя замены A2 и K4 в пептиде SIINFEKL были описаны, соответственно, как агонист и нулевой лиганд для OT-I TCR in vitro , 24 , 46 , 47 , существуют некоторые разногласия. для мутантов E1 и G4. В то время как некоторые исследования определили G4 как частичный агонист, 25 , 45 в других этот мутант был охарактеризован как антагонист. 46 С другой стороны, вариант E1 был определен in vitro либо как нулевой 46 , либо как антагонистический лиганд для OT-I TCR. 47 , 50

В экспериментальных условиях, использованных в настоящем исследовании, мы наблюдали, что при экспрессии бактериями варианты OVA A2 и G4 ведут себя как агонистические лиганды для OT-I TCR in vitro . и только A2 in vivo . Эти результаты интересны, потому что они подтверждают теорию о том, что увеличение периода полужизни взаимодействия TCR / pMHC может влиять на эффекторный потенциал Т-клеток in vivo без видимого снижения пролиферации, что согласуется с фенотипом частичного агониста.Таким образом, эти наблюдения согласуются с нашими предыдущими данными, показывающими, что полная активация Т-клеток происходит только в течение оптимального периода полужизни взаимодействия TCR / pMHC. 10 , 18 , 34

Напротив, бактерии, экспрессирующие E1 или K4, не смогли активировать Т-клетки ОТ-I и вели себя как нулевые лиганды. Учитывая, что наши эксперименты были выполнены с использованием профессиональных APC, наивных Т-клеток и экспрессируемых бактериями антигенов, вполне вероятно, что наблюдаемые ответы Т-клеток на варианты OVA могут воспроизводить ответы, индуцированные бактериальными антигенами, которые связываются с вариантами периода полураспада с отвечающие TCR.

На основании ранее измеренных периодов полураспада для взаимодействия между OT-I и вариантами H-2K b / SIINFEKL () 24 мы заключаем, что только взаимодействия TCR / pMHC выше минимального порога полураспада способен активировать Т-клетки в ответ на бактериальное заражение. Однако следует отметить, что, хотя увеличенный период полужизни, продемонстрированный мутантом G4, привел к активации Т-клеток in vitro , это не привело к увеличению эффективности активации Т-клеток ОТ-I.Напротив, мы обнаружили, что, несмотря на более длительный период полужизни, вариант G4 был менее эффективен, чем OVA дикого типа при активации Т-клеток OT-I in vivo . В соответствии со своей пониженной эффективностью вариант G4 индуцировал значительно сниженную секрецию IFN-γ Т-клетками CD8 + по сравнению с OVA дикого типа или вариантом A2. Эти результаты согласуются с моделью кинетической корректуры 12 , 13 и идеей о том, что эффективная активация Т-клеток может быть нарушена чрезмерно короткими или длинными периодами полужизни взаимодействия TCR / pMHC. 10 , 18 , 34 Однако важно отметить, что значения периода полураспада, показанные в, получены из измерений поверхностного плазмонного резонанса, выполненных при 25 ° с мономерными молекулами TCR и pMHC. 24 , 25 Эти значения периода полураспада TCR / pMHC были выбраны для объяснения наших результатов, поскольку они соответствуют продолжительности одиночного молекулярного взаимодействия между парой TCR / pMHC, отражающего реакцию первого порядка. 24 Хотя измерения периода полураспада, проведенные при 37 ° для каждой пары TCR / pMHC, использованной в этом исследовании, показали различия по сравнению со значениями, полученными при 25 °, наблюдалась эквивалентная иерархия периодов полураспада. 25 , 47 Единственным очевидным исключением является мутант G4, который показал более короткий период полужизни, чем OVA дикого типа или A2 при 37 °. 25 Однако это очевидное несоответствие можно объяснить тем фактом, что при 37 ° как OVA дикого типа, так и A2 связывают TCR с кинетикой второго порядка, согласующейся с димеризацией TCR.Это явление, по-видимому, не относится к варианту G4, который связывает TCR с кинетикой первого порядка при обеих температурах. 25 Наблюдение, что значения первого порядка (мономерный) k от для G4 медленнее, чем для OVA дикого типа и A2 как при 25 °, так и 37 °, согласуется с представлением о том, что до димеризации TCR, G4 обеспечивает более сильный контакт с OT-I TCR по сравнению с OVA дикого типа или вариантом A2. Тем не менее, этот анализ не исключает возможности того, что отсутствие реакции второго порядка при 37 ° для варианта G4 и его уменьшенный общий период полураспада при этой температуре могут быть ответственны за снижение способности праймировать эффекторные ответы OT-I.Чтобы различить эти две гипотезы, необходимы дальнейшие исследования.

Наши данные согласуются с возможным селективным преимуществом для тех бактерий, которые способны продуцировать Т-клеточные эпитопы, которые связывают TCR с периодами полужизни, которые препятствуют эффективной активации Т-клеток. Эта стратегия, которая была охарактеризована ранее для нескольких вирусов, 29 , 31 , 32 также может представлять собой возможный механизм уклонения от иммунитета, используемый бактериальными патогенами.Если часть инфекционных бактерий мутирует свои антигены с образованием антагонистов или нулевых лигандов, они могут уклоняться от иммунитета, предотвращая активацию Т-клеток.

Представленные здесь данные подтверждают мнение о том, что время полужизни взаимодействия TCR / pMHC может значительно влиять на активацию Т-клеток, вызванную бактериальным заражением. Согласно нашим наблюдениям, активация Т-клеточного ответа на инфекцию будет зависеть от кинетики связывания между молекулами TCR и комплексами pMHC, содержащими бактериальные антигены.Следовательно, клиренс бактерий будет зависеть от периода полужизни взаимодействия TCR / pMHC, что может использоваться патогенными бактериями для уклонения от адаптивного иммунитета.

На главную — OWA — Оденвальд Фазерплаттенверк ГмбХ

На главную — OWA — Оденвальд Фазерплаттенверк ГмбХ

OWAplan

Коллекция OWAconsult

Уже в продаже

Металлические потолки премиум-класса, разработанные OWA

Health

Health

, наш самый ценный актив

Для архитекторов, дистрибьюторов и подрядчиков

Структура RAW

Коллекция OWAconsult

RAW серый

Коллекция OWAconsult

Глина RAW

Коллекция OWAconsult

OWAplan

000 Коллекция OWAplan

0002 OWAplan Sinfonia

000 Коллекция OWAplan

Коллекция OWAlifetime

OWAplan

Коллекция OWAconsult

Новости

Прогресс и традиции —


мы создаем атмосферу.

Металлические потолки OWAtecta

Опыт проектирования и функционирования

О

Библиотека BIM / Revit

Программное решение для визуализации

Около

Ассортимент продукции

Поставщик решений с 1948 года: познакомьтесь с нашим разнообразным ассортиментом продукции

Благодаря чистой и четко определенной акустике в помещении возникает культура приятного и продуктивного разговора, комфорт позволяет сосредоточиться на действиях, образ жизни создает творческую и современную среду.Будь то простые и сдержанные или выразительные, наши постоянно расширяющиеся линейки продукции обеспечивают правильное и стильное решение для любого предприятия.

Коллекция OWAconsult

Потолки с уникальным и функциональным дизайном

О компании

Контакты

Головной офис:
OWA — Odenwald Faserplattenwerk GmbH
Dr.-F.-A.-Freundt-Straße 3, Германия
Тел. +49 93 73.2 01-0, электронная почта: [email protected]

OWA (UK) Ltd.
Castle Hill House, 12 Castle Hill, Windsor, Berkshire, SL4 1PD
Тел .: +44 (0) 1753 552 489, электронная почта: [email protected]

OWA USA Corporation
131 Ridge Rd., Unit 1N, Мюнстер, IN 46321 | USA
Телефон: 1-800-487-4308, электронная почта: [email protected]

2019 © Odenwald Faserplattenwerk GmbH

Когда вы посещаете наш веб-сайт, мы используем файлы cookie и аналогичные технологии, которые позволяют нам оценивать поведение посетителей. Данные собираются для отслеживания, анализа и измерения дальности.Подробную информацию о целях обработки данных можно найти в разделе «Сведения о файлах cookie». Для этих целей мы работаем вместе с поставщиками услуг и третьими сторонами, которые также обрабатывают данные для своих целей и, при необходимости, объединяют их с другими данными.

Нажимая кнопку «Принять все» или выбирая отдельные файлы cookie в подробном представлении, вы даете свое согласие на обработку ваших данных для соответствующих целей. Это добровольно, не требуется для использования онлайн-предложения и может быть отменено в будущем, нажав кнопку «Отозвать согласие» в нашем заявлении о защите данных.

Принять все

Сохранить

Индивидуальные настройки конфиденциальности

Детали файлов cookie Защита данных Отпечаток

Настройки конфиденциальности

Здесь вы найдете обзор всех используемых файлов cookie.Вы можете дать свое согласие на использование целых категорий или отобразить дополнительную информацию и, таким образом, выбрать только определенные файлы cookie.

Имя Borlabs Cookie
Провайдер Eigentümer dieser Веб-сайт
Назначение Speichert die Einstellungen der Besucher, die in der Cookie Box von Borlabs Cookie ausgewählt wurden.
Имя файла cookie Борлабс-печенье
Срок действия cookie 1 Jahr
Имя Бесучер-Континент
Провайдер Eigentümer dieser Веб-сайт
Назначение Speichert den aktuellen Kontinent des Website-Besuchers zur korrekten Anzeige des Produktportfolios
Имя файла cookie owa_continent
Срок действия cookie 1

Маркетинговые файлы cookie используются третьими сторонами или издателями для отображения персонализированной рекламы.Они делают это, отслеживая посетителей на веб-сайтах. Статистические файлы cookie собирают информацию анонимно. Эта информация помогает нам понять, как посетители используют наш веб-сайт.

Показать информацию о файлах cookie Скрыть информацию о файлах cookie

Принять
Имя Пиксель Facebook
Провайдер Facebook Ireland Limited
Назначение Cookie von Facebook, das für Website-Analysen, Ad-Targeting und Anzeigenmessung verwendet wird.
Политика конфиденциальности https://www.facebook.com/policies/cookies
Имя файла cookie _fbp, act, c_user, datr, fr, m_pixel_ration, pl, присутствие, sb, spin, wd, xs
Срок действия cookie Sitzung / 1 Jahr

Промышленные потолки | Rockfon

Тяжелая промышленность предъявляет другие требования по сравнению с пищевой, фармацевтической или перерабатывающими предприятиями, каждая из которых сталкивается со специфическими проблемами акустики и микроклимата в помещении, которые необходимо контролировать.

При проектировании производственных площадей необходимо учитывать множество различных критериев: контроль промышленного шума, соответствующие условия освещения, повышенная безопасность и, в некоторых случаях, высокий уровень гигиены.

Повышение безопасности за счет улучшенной акустики

Промышленные потолочные панели, выбранные за их высокое звукопоглощение, помогают снизить негативное воздействие длительного воздействия профессионального шума и предотвратить необратимую потерю слуха у рабочих. Хорошо спроектированные системы шумоподавления внутри здания в промышленном секторе могут снизить затраты, связанные с индивидуальными средствами защиты слуха и судебными разбирательствами, связанными с необратимым нарушением слуха.

Иногда подвесная система с потолочной решеткой не может быть установлена ​​в промышленном секторе. Это может быть связано с директивой, которая не распространяется на служебные установки и оборудование объекта. Акустические перегородки или звукопоглощающие потолочные облака и острова могут стать отличной альтернативой традиционной плитке для подвесного потолка как при новом строительстве, так и при реконструкции существующих зданий.

Готовые потолочные решения выходят за рамки заводского цеха, обеспечивая конфиденциальность и концентрацию внимания.

Внутри обширных производственных центров и складских помещений обычно есть офисы, конференц-залы, учебные комнаты, кафетерии и другие внутренние помещения с отдельными и определенными функциями. В этих областях промышленный подвесной потолок может быть идеальным решением.

Для приватных разговоров, происходящих вне пола, звукопоглощающие потолочные плитки можно комбинировать со звукоизоляционными стенами во всю высоту или ограждениями, чтобы защитить конфиденциальные разговоры. Такой подход к оптимизированной акустике также может помочь работникам, которым нужен тихий перерыв или место для концентрации.

Высокий уровень загрязняющих веществ и загрязняющих веществ также может привести к потере концентрации и раздражению. Наши потолочные изделия из каменной ваты сертифицированы в соответствии со стандартами GREENGUARD® по низким выбросам химических веществ в воздух в помещении во время использования продукта.

Освещение также играет роль в концентрации внимания. Равномерное рассеивание света, обеспечиваемое потолочной панелью с высокой отражающей способностью, может помочь свести к минимуму отвлекающие горячие точки и блики на экранах компьютеров и мониторах оборудования. Потолки с высоким коэффициентом отражения света также помогают снизить потребление энергии за счет более эффективного рассеивания как естественного освещения, так и энергосберегающих светодиодов или другого искусственного света.

Хорошее освещение, качество окружающей среды в помещении и акустика — все это признано частью здоровой и экологически безопасной практики на объектах, сертифицированных по стандарту LEED®, и других зеленых зданиях.

Защита здоровья и гигиены

Концентрация, чистота и гигиена могут быть обязательными в цепочке поставок, когда она связана с производством и хранением лекарств, продуктов питания или других строго регулируемых продуктов.

Строгие и строгие правила охраны здоровья относятся к поверхностям, используемым в этих отраслях, во избежание распространения бактерий.Возможность чистить и дезинфицировать строительные материалы, включая потолочные системы, имеет важное значение для защиты здоровья как тех, кто работает в этих помещениях, так и людей, получающих продукцию, произведенную или хранящуюся там.

Все наши изделия из каменной ваты и металлических потолков по своей природе водонепроницаемы и не способствуют росту потенциально вредных бактерий и микроорганизмов.

Там, где в таких чувствительных средах может потребоваться дополнительная защита, наша линейка потолков из каменной ваты Rockfon® Hygienic Plus ™ отвечает требованиям, которые дополнительно минимизируют риск загрязнения.Эти продукты также соответствуют требованиям к низкому уровню выбросов твердых частиц и соответствуют классу чистых помещений 5 по ISO (ISO 14644-1).

OMRON представляет лазерный датчик E3AS-HL — Innovations Food

Новая сенсорная технология обнаруживает сложные цели и снижает потребность в сложной конструкции установки

Компания OMRON представила новый лазерный датчик CMOS E3AS-HL * 1 с первой в отрасли технологией обнаружения * 2 , которая значительно улучшает возможности обнаружения.Надежное обнаружение труднообнаруживаемых целей избавляет от необходимости трудоемкого проектирования установки и настройки при вводе оборудования в эксплуатацию.

На обнаружение с использованием обычных отражающих фотоэлектрических датчиков влияет цвет, материал или поверхность цели, и для разработки и настройки установки датчика для каждой цели требуется человеческий опыт и навыки. Эта проблема часто возникает в автомобильной и пищевой промышленности, где обнаруживаются различные объекты сложной формы и глянцевой поверхности.

Новый лазерный датчик CMOS E3AS-HL может надежно обнаруживать цели, которые не могут быть обнаружены с помощью отражающих фотоэлектрических датчиков. Его первый в отрасли алгоритм обнаружения обеспечивает высокоскоростную выборку со скоростью 10 000 раз в секунду, а уникальная обработка накопления OMRON повышает чувствительность за счет усиления малейшего количества света, отражающегося от цели. Технология производства регулирует положение линзы приемника в датчике до уровня микрометра * 3 , обеспечивая надежное обнаружение любого цвета, материала и формы объекта.

Эти технологии позволяют датчику E3AS-HL надежно обнаруживать изогнутые глянцевые автомобильные детали и детали неправильной формы, а также разноцветные и глянцевые продукты питания и упаковки. Датчик E3AS-HL может использоваться там, где использовались отражающие фотоэлектрические датчики, и помогает значительно сократить время, необходимое для регулировки положения и угла установки датчика, а также пороговых значений.

Основные характеристики:

  1. Надежное обнаружение сложных объектов сокращает время проектирования и ввода оборудования в эксплуатацию
  2. Повышенная гибкость конструкции оборудования сокращает время проектирования
  3. Необрастающее покрытие чувствительной поверхности обеспечивает стабильную работу даже в суровых условиях (подана заявка на патент * 4 )
  4. Дисплей
  5. OLED и обучение обеспечивают простую, быструю и оптимальную настройку

Для получения дополнительной информации посетите: https: // industrial.omron.co.uk/en/products/e3as

(* 1) Лазерный датчик CMOS — это тип отражающего фотоэлектрического датчика. Он использует принцип триангуляции и имеет лазерный излучатель и приемник CMOS-датчика изображения.

(* 2) Первый в отрасли лазерный КМОП-датчик класса 1, оснащенный ПЛИС. По результатам расследования OMRON, проведенного в сентябре 2020 г.

(* 3) Микрометр — одна тысячная миллиметра. 1 микрометр = 0,01 миллиметра

(* 4) «Патент заявлен» означает, что компания OMRON подала заявку на патент в Японии, а «Запатентовано» означает, что компания OMRON получила патент в Японии.(По состоянию на август 2019 г.)

Innovations in Food (& Beverage) Processing & Packaging — ежеквартальный журнал, распространяемый по всему миру как в печатном, так и в цифровом форматах. www.innovationsfood.com. Twitter: @Innovfoodtech. Instagram: @innovationsinfoodtechnology. Linkedin: www.linkedin.com/in/ terry-Prior52

Эффективное и гибкое оборудование для 21 века

Ряд недавних усовершенствований в конструировании векторов экспрессии с высоким титром, в разработке биофармацевтических процессов и в строительстве предприятий объединились, чтобы представить новые возможности для рентабельного, гибкого строительства объектов биопроизводства.Эволюция требований к биофармацевтическим объектам обусловлена ​​глобализацией биофармацевтической промышленности, истечением срока действия патентов на некоторые биофармацевтические продукты, а также растущим сдвигом в разработке новых продуктов от лекарств-блокбастеров к более персонализированным, нишевым продуктам.

Увеличение количества разрешенных продуктов (в первую очередь моноклональных антител, MAb) и рост продаж на 10% в год в течение последних пяти лет превратили биофармацевтическую промышленность почти исключительно в «индустрию моноклональных антител».«Продукты, связанные с MAb, в настоящее время составляют значительную часть всех биофармацевтических препаратов, одобренных на сегодняшний день, и, как ожидается, будут продолжать стимулировать будущий спрос на производственные мощности биофармацевтических препаратов (1,2,3). Кроме того, поскольку многие ранние продукты MAb перестают быть запатентованными, конкуренция за разработку и продажу биоподобных версий этих продуктов быстро возрастает (4).

Ожидается, что не только продажи биоподобных препаратов на рынках США и Европы будут расти, но и растущий спрос на доступ к доступным биологическим продуктам на развивающихся рынках Бразилии, России, Индии и Китая (БРИК) также будет стимулировать дальнейший рост таких продаж.Ожидаемый рост продаж в сочетании со стремлением к местному производству важнейших лекарств приведет к увеличению спроса на производственные мощности, которые могут быть установлены и эксплуатироваться в этих странах. Таким образом, очевидна потребность в относительно простых, но гибких объектах биопроизводства, которые можно легко воспроизвести в нескольких местах.

Как и все другие биофармацевтические продукты, MAb традиционно производились на крупных предприятиях с несколькими стационарными биореакторами из нержавеющей стали размером от 100 до 20 000 л; фиксированное и негибкое пространство для последующей обработки; и сложные трубопроводы для доставки буферов и сред, транспортировки продукта и очистки большого количества стационарных резервуаров из нержавеющей стали и другого оборудования.Такие объекты часто предназначались для производства одного продукта каждый или для проведения кампании только нескольких продуктов. Но ряд тенденций сходятся, чтобы создать спрос на более компактные, более гибкие и рентабельные производственные мощности. Эти тенденции включают в себя резкое увеличение титров продуктов и выхода, развитие и доступность одноразовых технологий, давление с целью снижения затрат на здравоохранение, желание (или, в некоторых случаях, требование) к местному производству и усиление внимания к персонализированной медицине для небольшой ниши. рынки.



Увеличение титров продуктов: Одной из наиболее значительных тенденций в биопроизводстве за последнее десятилетие стало резкое увеличение объемной производительности процессов, основанных на культуре клеток млекопитающих, в частности, экспрессии MAb. Благодаря разработке улучшенных сконструированных родительских клеточных линий и векторов экспрессии, улучшенных сред и кормовых композиций, а также более надежной способности измерять и контролировать условия процесса биореактора, несколько групп сообщили о титрах антител 10 г / л или выше в супернатантах клеточных культур ( 5,6,7,8).В сочетании с улучшениями в последующей переработке общий выход технологического процесса составляет 1–3 г / л.

Хотя такие титры продуктов и выходы еще не являются обычным делом, все больше и больше компаний достигают таких уровней производительности. Таким образом, разумно ожидать, что большинство новых процессов производства MAb вскоре обычно достигнет производительности> 5 г / л. Высокие титры продукта в сочетании с выходами последующих процессов ≥70% (9) приведут к общему выходу процесса> 3 г / л для многих разрабатываемых продуктов MAb — и даже для тех, которые уже находятся на рынке после внедрения процессов следующего поколения.

При такой производительности биореактор на 15000 л будет производить 75 кг лекарственного вещества за партию, а традиционная установка «с шестью упаковками» (включающая шесть биореакторов на 15000 л) может производить метрическую тонну (1000 кг) продукта всего за шесть недель. Для самых крупных в настоящее время продуктов, полученных из культур клеток, требуется около одной метрической тонны в год. Таким образом, это значительный прогресс по сравнению с предыдущими уровнями производительности и предполагает, что будущие объекты биопроизводства будут построены вокруг меньшего количества биореакторов меньшего размера (например,г., два или три реактора емкостью от 2000 л до 5000 л). Хотя масштабы биореактора будут уменьшены, на этих объектах все же потребуются значительные последующие технологические операции для поддержки очистки продукции их биореакторов.

Одноразовые технологии для биопроизводства

За последнее десятилетие технологии одноразового использования все чаще используются в производстве биофармацевтических продуктов. Применения варьируются от использования Lonza биореакторов GE Healthcare Wave в линии посевного материала для крупномасштабных производственных биореакторов в Портсмуте, штат Нью-Хэмпшир (10), до использования Shire в одноразовых биореакторах и других одноразовых технологиях в восходящей части своего нового коммерческого продукта ATLAS производственный комплекс (11, 12).В настоящее время компании рассматривают проекты помещений, в которых используются одноразовые изделия на всех этапах производства (13, 14).

Многие факторы способствуют внедрению таких технологий в биопроизводстве, особенно на предприятиях, где производятся различные продукты. Одноразовые материалы повышают гибкость, снижают требования к дорогостоящим критически важным ресурсам (например, вода для инъекций, WFI и чистый пар), уменьшают требования к очистке и валидации очистки оборудования, сокращают капитальные вложения и сокращают время строительства объекта (15, 16).

Хотя эти причины для внедрения одноразовых технологий в биопроизводство убедительны, некоторые проблемы и опасения, связанные с их использованием, остаются. Одноразовые материалы действительно увеличивают текущие эксплуатационные расходы, связанные с покупкой и утилизацией расходных материалов. Вымываемые и экстрагируемые вещества с поверхностей, контактирующих с продуктом, могут загрязнять продукты. Ограничения на поставку связаны с покупкой одноразового оборудования, для которого нет согласованных и единообразных норм стандарта
, которые еще не охватывают многочисленные разъемы, необходимые для установки и использования.И в настоящее время отсутствует опыт регулирования многих таких технологий.

Тем не менее, производители биофармацевтических препаратов — от небольших начинающих компаний до крупных спонсоров продукции и директоров по маркетингу — все чаще внедряют одноразовые изделия. Одноразовые биореакторы особенно популярны при производстве биофармацевтических препаратов как для клинических испытаний, так и для коммерческой продажи.

Одноразовые биореакторы в настоящее время выпускаются объемом до 2 000 л и используются для производства материалов для клинических испытаний в объеме от 20 до 2 000 л.Первой такой технологией, широко доступной для использования в биопроцессах, была система волнового биореактора (теперь от GE Healthcare Life Sciences в Уппсале, Швеция), автономный одноразовый мешок с перемешиванием / перемешиванием, обеспечиваемым внешним качалкой платформы (17). После этой ранней попытки создания одноразового биореактора несколько компаний разработали альтернативы, напоминающие стандартную цилиндрическую конструкцию резервуара с мешалкой, которая уже широко используется в биореакторах из нержавеющей стали, установленных в биофармацевтической промышленности.Примеры включают Xcellerex (теперь часть GE Healthcare Life Sciences), Thermo Scientific HyClone и Sartorius Stedim Biotech. Для одноразовых биореакторов на производственном объекте устанавливается фиксированная опора, содержащая программное обеспечение для управления технологическим процессом, затем одноразовый биореактор предоставляется в виде мешка, который можно вставить в эту опорную конструкцию (18). Перемешивание обычно обеспечивается установленной крыльчаткой, которая является одноразовой, как мешок, и прикрепляется к двигателю в опорной конструкции. Кормление, pH и растворенный кислород (DO) контролируются с помощью установленных портов и датчиков.

Несколько исследований показывают, что процессы культивирования клеток и критические характеристики качества продуктов, полученных с помощью таких процессов, сопоставимы в одноразовых биореакторах и биореакторах из нержавеющей стали того же размера (19,20,21). Например, Смелко и др. продемонстрировали, что для высокоинтенсивных процессов культивирования яичников китайского хомячка (CHO) или NS0 продукт из одноразовых биореакторов в стандартной конфигурации вплоть до шкалы 1000 л сопоставим по всем биохимическим анализам с продуктом из биореактора из нержавеющей стали объемом 1000 л ( 22).В этом исследовании последовательность посевного материала, сбор урожая и все последующие этапы обработки были выполнены с использованием идентичного оборудования и методов, единственное различие — тип биореактора.

Фото 1:


Фото 2:


Фото 3:


Были разработаны другие одноразовые биореакторные системы с новой геометрией и механизмами перемешивания клеток, перемешивания и контроля питательных веществ и pH.Было показано, что продаваемые на рынке биореакторы квадратной или прямоугольной формы от таких компаний, как ATMI Life Sciences, поддерживают рост клеток млекопитающих с характеристиками смешивания и производительностью, аналогичными характеристикам и производительности более традиционных цилиндрических геометрических фигур (23). Компания PBS Biotech представила другую конструкцию с использованием смесителя с воздушным колесом, приводимого в действие барботажными газами (24). Также недавно был представлен орбитальный шейкер с объемами производства ≤1 500 л (25). Когда агрегат работает на подходящей скорости, его геометрия обеспечивает адекватное перемешивание и аэрацию без крыльчатки.Подобно одноразовым биореакторам более традиционной конструкции, эти типы с альтернативной геометрией также состоят из фиксированной опорной оболочки, в которую для использования помещается одноразовый мешок.

Чтобы одноразовые биореакторы могли полностью реализовать свой потенциал в биопроизводстве, как пользователи, так и поставщики определили ряд областей и возможностей для улучшения. Они указали на необходимость в улучшенных одноразовых сенсорных элементах, особенно тех, которые могут поддерживать калибровку в течение продолжительного времени работы современных высокопроизводительных процессов культивирования клеток (26).Другие потенциальные улучшения включают в себя более крупные перегрузочные порты для облегчения сбора урожая и перевалки больших объемов, а также улучшенную конструкцию одноразовых пакетов для уменьшения количества отказов из-за утечек.

Эта последняя проблема вызывает серьезное беспокойство у компаний, внедряющих одноразовые биореакторы, потому что утечки из мешков могут привести к дорогостоящим потерям во время производственных циклов. Чтобы помочь решить эту проблему, ATMI недавно представила новую тестовую систему как часть своих критериев выпуска одноразовых пакетов, чтобы подтвердить их целостность перед отправкой клиентам (27).Метод испытания включает заполнение полностью собранного одноразового биореактора гелием и отслеживание любого выхода газа с помощью специальных датчиков, установленных на внешней стороне мешка. ATMI утверждает, что этот метод может обнаруживать отверстия размером до 10 мкм, что делает метод намного более чувствительным, чем другие тесты на герметичность мешков.

Все эти и многие другие инновации в разработке, несомненно, продолжат совершенствовать одноразовые биореакторы и облегчат их внедрение в будущем.

Одноразовые технологии для последующей обработки: Разработка одноразовых продуктов для последующей обработки для эффективной и экономичной эксплуатации в клинических или промышленных масштабах отставала от разработки одноразовых биореакторов.Но недавние значительные усилия со стороны как существующих, так и новых поставщиков оборудования для биотехнологий и продуктов разделения привели к появлению широкого спектра масштабируемых одноразовых продуктов для последующей обработки.

Для пояснения: несколько поставщиков теперь предлагают одноразовые глубинные фильтры в разных масштабах. Таким образом, производители биотехнологий могут выбирать между универсальными корпусами из нержавеющей стали для обычных глубинных фильтров или одноразовыми глубинными фильтрующими кассетами с одноразовыми поверхностями, контактирующими с продуктом, для операций по очистке.Многие часто используемые глубинные фильтрующие материалы от
различных поставщиков теперь доступны как в обычных, так и в одноразовых форматах (28, 29).

Точно так же первые одноразовые кассеты для фильтров с поперечным потоком стали доступны в последнее десятилетие и теперь широко используются в биопроизводстве. Кроме того, разрабатываются системы «однопроходной ультрафильтрации». Они позволяют концентрировать тангенциальный поток и диафильтрацию без рециркуляции раствора ретентата. В будущем подход может быть преобразован в одноразовый формат.

Одной из самых сложных операций по преобразованию в одноразовые технологии была хроматография, которая является сердцем большинства процессов очистки биофармацевтических препаратов. Некоторые поставщики теперь предлагают предварительно упакованные хроматографические колонки в пластмассовых или недорогих стеклянных корпусах.

Они предназначены для утилизации после одного или нескольких циклов, но из-за высокой стоимости хроматографических сред некоторые производители предпочитают использовать их для кампании из нескольких партий, а не выбрасывать колонку после одного цикла.

Хотя это обеспечивает работоспособное решение до определенного масштаба, некоторые практические ограничения могут препятствовать использованию одноразовых хроматографических колонок в очень больших масштабах. Чтобы обойти эти ограничения, несколько компаний разрабатывают технологии непрерывной хроматографии, такие как моделируемый движущийся слой (SMB), чтобы уменьшить масштаб и капитальные затраты на хроматографические колонки и системы, необходимые для последующей обработки. По крайней мере, одна компания, Tarpon Biosystems, создает SMB с полностью одноразовым потоком (30).Как и другие непрерывные процессы, SMB по своей сути более эффективен в масштабировании. Таким образом, с помощью такой технологии можно очистить больше материала с использованием одноразовых хроматографических колонок современного масштаба, чем это было бы возможно при использовании обычных периодических операций.

В качестве альтернативы колоночной хроматографии мембранные адсорберы уже широко используются для проточных применений, в которых интересующий продукт протекает, а примеси остаются связанными с колонкой. Распространенным применением является использование анионообменных мембранных адсорберов для очистки нуклеиновых кислот или белков клетки-хозяина в процессах MAb (31).К сожалению, современные мембранные адсорберы не обладают способностью колоночной среды для стадий хроматографии, на которых продукт связывается со средой (так называемые стадии «захвата»). Таким образом, промышленность нуждается в новой технологии мембранных адсорберов, которая обеспечивает надежные, масштабируемые мембранные адсорберы большой емкости, прежде чем эти устройства можно будет широко использовать в коммерческих биофармацевтических приложениях для «улавливания».

Использование одноразовых биореакторов и продуктов последующей обработки будет продолжать расти в ближайшее десятилетие, став обычным делом как для производства материалов для клинических испытаний, так и для коммерческих продуктов.В недавнем анализе экономических аспектов одноразовых систем для производства биофармацевтических препаратов и вакцин один из докладчиков конференции в 2010 году пришел к выводу, что, хотя они более экономичны для производства в производственных масштабах примерно <8000 л, выше этого уровня обычные системы из нержавеющей стали становятся экономичными. более привлекательный (32). Учитывая это и высокую эффективность современных процессов биопроизводства, будущие объекты будут преимущественно включать в себя несколько одноразовых биореакторов объемом 2000 л или меньше (13).Для тех немногих продуктов, которые требуют больших объемов производства, будет продолжено коммерческое производство с использованием традиционных биореакторов из нержавеющей стали, особенно как способ использования существующей большой установленной базы таких производственных мощностей.

Модульные биофармацевтические производственные мощности

В недавнем обсуждении производственных объектов следующего поколения автор утверждал, что предприятия по производству биопродуктов можно разделить на компоненты процессов, объектов и инфраструктуры (33).Каждый из них играет важную роль в успехе производственного предприятия. Неисправность или слабость любого из них приведет к низкому качеству продукции и / или неэффективному производству. Совершенствование производственных технологий и развитие одноразовых систем явно изменили биопроцессы. Наряду с этими усовершенствованиями технологического процесса идет модульная конструкция, которая существует уже несколько десятилетий. Он будет становиться все более и более распространенным, потому что модульные альтернативы могут иметь меньшую площадь основания, чем традиционные объекты, и быстро строиться в местах, где нет доступных специалистов по чистым помещениям и трубопроводам.

Вместе модульная технология и одноразовые технологии могут снизить инвестиционные и операционные расходы, а также потенциальные финансовые риски для новых предприятий по производству биофармацевтических препаратов (34). В таблице 1 приведен пример экономических выгод, которые могут быть получены от объединения модульной конструкции здания предыдущего поколения с расходными материалами. Как мы покажем в будущей статье, современное поколение модульных технологий строительства и проектирования (наряду с дальнейшим развитием одноразовых технологий) может снизить капитальные и эксплуатационные расходы еще больше, позволяя построить сопоставимые объекты менее чем за 12 месяцев.

Таблица 1: Расчетные затраты на установку биореактора на 1000 л


Согласно предварительному исследованию, приведенному в Таблице 1, использование расходных материалов снизило затраты на рабочую силу примерно на 30%, хотя затраты на сырье были почти на 20% выше для одноразового объекта. В результате чистая экономия для каждой производственной кампании составляет около 10%. Дополнительная экономия эксплуатационных расходов также достигается за счет отказа от замены насадки колонки и эластомера, а также снижения требований к валидации, калибровке и подготовке оборудования.Общее время обработки партии короче на одноразовом предприятии, что еще больше улучшает экономику процесса за счет увеличения количества партий, которые могут быть там произведены.

Как показывает пример, модульная конструкция предлагает такие преимущества, как улучшенное качество, повышенная гибкость и (возможно, самое важное) более экономичная конструкция. Модульное строительство обычно требует более скромных начальных капиталовложений, чем традиционные сооружения. Каждый модуль, составляющий конечный объект, может быть изготовлен в компании, которая хорошо знакома с уникальными требованиями строительства биофармацевтического оборудования.И большая часть стационарного оборудования может быть установлена ​​и протестирована на этом производственном участке до того, как полностью собранные модули будут отправлены на предполагаемую производственную площадку. Это сводит к минимуму технические и нормативные проблемы, возникающие при использовании традиционных строительных стратегий для строительства всего объекта на месте. Модульный объект можно легко переместить, если необходимо, после его первоначальной установки или легко расширить при необходимости.

Фото 4:


style = ’float: left; margin-left: 0px; margin-top: 5px; margin-right: 0px; margin-bottom: 7px; background-color: # f7f7f7; width: auto;’>


Оглядываясь назад: Модульность — это вид аутсорсинга, который включает перемещение некоторых строительных работ с фактического местоположения объекта на другое место, будь то внутреннее или международное.Различные степени модульности всегда были обычным явлением при проектировании биофармацевтических предприятий. Например, многие операции по производству биопродуктов включают технологические платформы, на которых оборудование устанавливается и перемещается в зону производственного чистого помещения и из него. Кроме того, модули оборудования используются для разделения рабочей нагрузки или уменьшения потенциально инвазивного строительства во время модернизации. Обе стратегии позволяют сконструировать сложное технологическое оборудование в контролируемой среде перед его установкой на реальном объекте.

Кроме того, широкое распространение получили строительство и установка комплексных модульных производственных мощностей для фармацевтических и биофармацевтических препаратов. С 1986 года по всему миру было построено более 70 таких модульных объектов. Одним из пионеров такого строительства была шведская компания Pharmadule, которая сейчас не работает. Однако многие активы и ключевой персонал этой компании сейчас входят в состав KeyPlants в Стокгольме, Швеция. Другие компании, предлагающие модульное строительство, включают Biologics Modular из Браунсбурга, штат Индиана (www.biologicsmodular.com) и G-Con из Колледж-Стейшн, Техас (www.gconbio.com).

Некоторые традиционные поставщики оборудования для биотехнологий, такие как GE Healthcare Life Sciences, Sartorius Stedim Biotech (SSB), NNE-Pharmaplan и Merck Millipore, начали предлагать полностью оборудованные модульные объекты. Через свою группу Enterprise Solutions GE предоставляет полностью собранные, квалифицированные и готовые к эксплуатации модули KUBio, оснащенные оборудованием GE. Точно так же SSB предлагает модульное чистое помещение G-Con FlexMoSys, оснащенное одноразовыми системами SSB и стандартизированным оборудованием.

Они привлекательны и подходят для простых установок, но такие предварительно упакованные модульные объекты имеют некоторые ограничения. Система KUBio, например, поставляется только в виде отдельного объекта и использует исключительно технологическое оборудование GE, что ограничивает гибкость и выбор конструкции и исключает ее установку в существующей оболочке здания. С другой стороны, средство FlexMoSys выпускается как в внутренней, так и в наружной версиях, поэтому его можно использовать либо как автономное средство, либо установить внутри существующей оболочки.В системе G-Con не используется исключительно оборудование SSB, поэтому у пользователей действительно есть выбор в отношении технологического оборудования. Однако текущая конструкция FlexMoSys не предназначена для биореакторов объемом> 1000 л. Еще одним недостатком всех доступных в настоящее время предварительно упакованных модульных объектов является то, что они предназначены только для массового производства, без приспособлений для операций заполнения-отделки.

Заглядывая в будущее: KeyPlants разработала инновационный подход к проектированию и строительству модульных объектов, который является гибким и экономичным и позволяет использовать технологическое оборудование от всех поставщиков.По сравнению с вышеупомянутыми вариантами, гибкость этой конструкции позволяет устанавливать биореакторы любого размера от любого поставщика и обеспечивает большую гибкость в компоновке и дизайне участков как до, так и после нее. Модули можно устанавливать и эксплуатировать в существующем здании или как отдельном модульном здании при наличии подходящих источников питания.

Кроме того, проект KeyPlants может включать в себя как производство нерасфасованных лекарств, так и операции наполнения-отделки в единой конструкции завода.

Как правило, более эффективное выполнение проекта за счет модульного проектирования и строительства может значительно сократить время вывода на рынок, что увеличивает чистую приведенную стоимость (NPV) и рентабельность инвестиций (RoI) для нового объекта. В будущей статье мы более подробно сравним и сопоставим затраты и экономические последствия модульной и традиционной конструкции объектов. Компании должны учитывать факторы времени и риска, связанные со строительством объекта, а также более очевидные факторы, такие как капитальные и инженерные затраты.Изучая эти экономические аспекты, важно включать такие переменные затраты, как затраты на архитектурные, инженерные услуги и услуги по управлению строительством; процентные ставки на вложенный капитал; и риск задержки строительства объекта. Эти переменные характерны для традиционного строительства, но в меньшей степени для модульных объектов. Последний подход обеспечивает наилучшую эффективность использования капитала, гарантируя, что инвестиции делаются только в минимальных вариантах.

Ключом к модульному дизайну является его интеграция с производственным процессом и разделение этого процесса на ключевые функциональные модули, которые могут быть воспроизведены на предприятии, что позволяет стандартизировать его.Компания KeyPlants подготовила такую ​​стандартную конструкцию для завода по производству MAb на основе типичного платформенного процесса (рисунок 3). Технологический процесс основан на одноразовом биореакторе на 2000 л с типичной последовательностью посевного материала и последующим процессом (35). Он также включает одноразовые предварительно набитые хроматографические колонки; одноразовые мембранные адсорберы; мешки для буферов, сред и промежуточного хранения продуктов; и максимальное использование одноразовых фильтров и других компонентов процесса. Чтобы свести к минимуму стоимость предварительно набитых колонок — особенно для стадии аффинной хроматографии с протеином А — рециркуляция колонок включена в каждую производственную партию.

Фото 5:


Использование этого стандартного процесса платформы в качестве основы для проектирования, предварительного изготовления и изготовления отдельных технологических модулей упрощается, а вариативность времени строительства и выполнения проекта сводится к минимуму. Для модульного строительства с использованием такой стандартизированной конструкции 75–80% всего процесса строительства происходит на заводе компании по производству модульного объекта, а оставшиеся 20–25% строительных работ выполняются на конечной площадке объекта, что значительно снижает загруженность объекта. при увеличении безопасности.Следовательно, общий подход модульного строительства значительно снижает риск, присущий строительству, установке и проверке.

Одним из основных отличий сегодняшних модульных объектов от предыдущих подходов является то, что они включают в себя все необходимые функции и оборудование
, необходимые для биофармацевтического предприятия. Модульный объект может быть поставлен как отдельно стоящее здание (включая фасад и кровлю) или как внутренние модули для установки в существующее здание или сборную оболочку.Модульное здание (внутреннее или внешнее) состоит из сборных структурных модулей. Их конструктивная конструкция соответствует соответствующим нормам (Европейского Союза, США и других), включая требования по сейсмостойкости, если это необходимо.

Для обеспечения полного соответствия мировым нормативным стандартам и ожиданиям полы отдельных модулей изготавливаются из железобетона или листового металла с ПВХ или эпоксидным покрытием. Чистые помещения для деятельности по переработке продукции построены с использованием панельной системы со встроенными стенами, потолками, дверями, окнами и т. Д.Дизайн чистых помещений включает в себя проходимые потолки с достаточным пространством для оборудования для обработки воздуха, воздуховодов и трубопроводов и распределения электроэнергии, а также доступ для обслуживания и обслуживания сверху. Такая же конструкция используется в изолированных помещениях для электроснабжения, инженерных коммуникаций и чистых коммуникаций. Размещая все вспомогательные системы (электрические; трубопроводы; отопление, вентиляцию и кондиционирование воздуха, HVAC; и т. Д.) В легко доступном пространстве над чистыми помещениями, каждый сборный модуль будет интегрировать распределение таких систем, при этом потребуется только одно подключение. сайт объекта.Это обеспечивает конструкцию «plug-and-play» и минимальные затраты на установку.

Устойчивость: Одним из ключевых преимуществ модульных зданий является то, что они обычно включают в себя функции, позволяющие получить сертификат LEED (Leadership in Energy and Environmental Design) (36). Используя процессы строительства завода и более эффективные линии поставок, модульный объект может потребовать значительно меньше ресурсов для строительства и развертывания, чем специально построенный объект на месте.

Включение одноразовых технологических процессов в модульное биотехнологическое предприятие могло бы еще больше увеличить его преимущества.Ролингс и Пора показали, что установка, основанная на одноразовой технологии, примерно на 50% менее энергоемкая, чем установка на основе систем из нержавеющей стали, потому что потребление и нагрев больших объемов воды для очистки и стерилизации многоразового оборудования требует больше энергии, чем производство и утилизация пластиковых пакетов, которые также можно сжигать для рекуперации энергии (37). По оценке Ходжа, внедрение одноразовых технологий на современном предприятии может привести к сокращению потребления воды и отходов примерно на 85% по сравнению с традиционным производством из нержавеющей стали (38).Однако экономия, полученная в результате этого сокращения использования воды и отходов, частично компенсируется затратами на удаление примерно трехкратного увеличения твердых отходов, в первую очередь пластика из одноразовых пакетов и биореакторов, образующихся на установке одноразового использования.

Исследования Mauter (39) и Pietrzykowski, et al. (40) недавно показали, что общее воздействие одноразовых технологий на поток отходов — и воздействие на окружающую среду — сводится к минимуму на протяжении всего жизненного цикла таких технологий.Например, Pietrzykowski, et al. показали, что в течение полного жизненного цикла производства совокупная потребность в энергии (CED) и потенциал глобального потепления (GWP) для производства MAb в одноразовых системах составляет 34% и 32% CED и GWP для завода по производству нержавеющей стали, соответственно ( 40).

Принимая во внимание все это и заметно увеличившуюся производительность современных процессов с высоким титром, становится очевидным, что установка следующего поколения, включающая одноразовые технологии, будет иметь значительно меньший углеродный след на килограмм произведенных моноклональных антител, чем если бы традиционное производственное предприятие с использованием систем из нержавеющей стали.

Об авторе

Сведения об авторе
Автор, ответственный за переписку Ховард Л. Левин — основатель, президент и главный консультант BioProcess Technology Consultants, Inc., а также основатель и главный операционный директор Biocrescentia LLC (12 Gill Street, Suite 5450, Woburn , MA 01801-1728; 1-781-281-2701; [email protected]). Ян Лиля — коммерческий директор KeyPlants AB; Рик Сток — консультант компании BioProcess Technology Consultants, Inc.; Ханс Хуммель — директор по развитию бизнеса KeyPlants AB; и Сьюзан Дана Джонс — вице-президент и старший консультант BioProcess Technology Consultants, Inc.

ССЫЛКИ

1.).

2.) Левин, Х.Л. и Г. 2010. Разработка терапевтических препаратов с моноклональными антителами, Elanders Sverige AB, Molnlycke.

4.) Шлеттер, Дж. Биосимиляры: проблемы и возможности для промышленности.Informa Life Sciences.

5.) Charlebois, TS. Достижение 10+ грамм / литр: проблемы в развитии процесса. IBC Life Sciences.

6.) Schott, C 2008. Упреждающее устранение узких мест: предварительное планирование узких мест в нисходящем направлении. BioProcess Int. 6: 18-23.

7.) Ryll, T. Как мы можем достичь 30 г / л, используя технологию Fed-Batch? Какие есть ограничения? IBC Life Sciences.

8.) Чен, Дж. Разработка процесса высокотитровой периодической культуры клеток с подпиткой для линий клеток СНО.

9.) Келли, Б. Разработка 10-тонного процесса MAb: ограничивает ли обычная хроматография ?.

10.) Мачульски, Дж. Пример проекта Lonza по установке для культивирования клеток объемом 20 000 л.

11.) Стаут, Дж. Производственная стратегия Шира и новый гибкий механизм, 2011 г. IBC Life Sciences Седьмой международный саммит по производству и развитию биофармацевтических препаратов, Сан-Диего.

12.) Чамброне Б. Смелое развертывание одноразовых технологий в коммерческих масштабах.IBC Life Sciences.

13.) Джонс, С.Д., и Т.К. Рансохофф. 2011. Одноразовые продукты для биопродукции: доступные варианты для культивирования клеток и последующей обработки. Являюсь. Фармацевтика. Откр. 14: 12-20.

14.) Роберс-младший. Будущие тенденции в биофармацевтических операциях и объектах. IBC Life Sciences.

15.) Ходж, Г. 2004. Одноразовые компоненты обеспечивают новый подход к биофармацевтическому производству. BioPharm Int. 17: 38-49.

16.) Фромисон, J 2009. Одноразовые материалы в клиническом производстве. Являюсь. Фармацевтика. Откр. 12: 20-27.

17.) Сингх В. 1999. Одноразовый биореактор для культивирования клеток с использованием волнового перемешивания. Cytotechnol. 30: 149-158.

18.) Робинсон, Дж. М. 2009. Альтернатива расширению масштабов и распространению вакцины против пандемического гриппа. BioPharm Int. 22: S12, S14-S15, S18, S20.

19.) Ноэ, В. Краткий обзор производственных процессов на основе эволюции клеточных культур и драйверов технологий за последние 25 лет.

20.) Polès-Lahille, A. 2011. Одноразовые биореакторы: от разработки процесса до производства. BMC Proc. 22: S2.

21.) Эйбл, Р. 2010. Одноразовые биореакторы: современное состояние и рекомендуемые применения в биотехнологии. Прил. Microbiol. Biotechnol. 86: 41-49.

22.) Смелко Ю.П. 2011. Производительность высокоинтенсивных культур клеток млекопитающих с подпиткой в ​​одноразовых биореакторных системах. Biotechnol. Прог. 27: 1358-1364.

23.) Крейг, Дж. И Р. Бхелла. 2011. Шаг к стандартизации пленок для одноразовых биотехнологических сосудов. BioProcess Int. 9: S4
2-S46.

24.) 2012 г. PBS Biotech: Products and Technology, PBS Biotech, Inc, Камарилло.

25.) Стеттлер, М. 2007. Новые орбитальные встряхивающие биореакторы для временного производства IgG, полученных из СНО. Biotechnol. Прог. 23: 1340-1346.

26.) Whitford, W. 2011. Улучшение возможностей мониторинга процессов в SUB-разработке биопроцессов, Неделя разработки и производства антител IBC Life Sciences, Бельвю.

27.) 2011. Пресс-релиз: ATMI объявляет о проведении испытаний на целостность гелия для одноразовых сосудов для биотехнологий, ATMI, Inc, Данбери.

28.) Лутц, Х .. 2009. Соображения по поводу увеличения глубины фильтрации собранной жидкости клеточной культуры. BioPharm Int. 22: 58-66.

29.) Мюль, М. и Д. Сиверс. 2011. Сбор клеток биотехнологических процессов с помощью глубокой фильтрации: влияние дизайна системы и режима работы на масштабируемость процесса.BioProcess Int. 9: 86-88.

30.) Бишопс, М. 2009. Одноразовая, непрерывно-противоточная, многоколоночная хроматография. BioProcess Int. 7: S18-S23.

31.) Lajmi, AR, S. Nochumson, and A Berges. 2010. Влияние агрегации антител на проточный анионообменный мембранный процесс. Biotechnol. Прог. 26: 1654-1661.

32.) Ли, EK. Одноразовые технологии в производстве биопрепаратов и вакцин.

33.) Ведьмак, MF и J Odum.

Обновлено: 01.05.2021 — 17:49

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *